安諾倫代理Abbexa——人SH2B銜接蛋白1(SH2B1)ELISA試劑盒
Abbexa 是一家專門為生命科學、藥物開發(fā)和生物技術領域提供生物工具的全球供應商。Abbexa 為科學界提供一抗、二抗、蛋白質、ELISA 試劑盒和酶以及其他專為研究而設計的試劑盒和工具,產品涵蓋單克隆抗體、多克隆抗體、純化蛋白質及生物試劑。
品牌優(yōu)勢:
1.產品量多時廠家提供的折扣力度大;
2.直郵產品,貨期短;
3.廠家擁有專業(yè)的技術團隊,他們隨時可以幫助解決任何疑問,并熱衷于提供答案和解決方案,24小時內回應問題,響應快,解決度百分百,可提供退/換貨服務
具體案例分析:
試劑盒名稱:Human SH2B Adaptor Protein 1 (SH2B1) ELISA Kit
貨號:abx383165??
規(guī)格:96tests
存儲溫度:按試劑盒說明,標準品、96孔板及A、B液置于-20℃,其余產品置于2-8℃冰箱
此產品用于科學研究,研究目的:檢測不同體重狀態(tài)人群SH2B1水平,驗證肥胖相關基因多態(tài)性與蛋白表達差異
實驗流程:
一、標準品制備
1、離心標準品
2、取1000ul標準稀釋緩沖液加入標準品中,充分混勻,靜置10分鐘,此為標準管1
3、在標準管2、3、4、5、6、7中加入標準稀釋緩沖液500ul
4、從標準管1中取出500ul加入標準管2,充分混勻,從標準管2中取出500ul加入標準管3,依次進行梯度稀釋
5、標準管8為空白對照,加入標準稀釋緩沖液500ul
二、預實驗樣品制備
1、準備標本1、標本2
2、將標本1使用樣品稀釋緩沖液進行稀釋10倍,20倍,50倍,標記為樣品管1、2、3(樣品管1為50ul樣品+450ul樣品稀釋緩沖液,樣品管2為25ul樣品+475ul樣品稀釋緩沖液,樣品管3為10ul樣品+490ul樣品稀釋緩沖液)
3、將標本2使用樣品稀釋緩沖液進行稀釋10倍,20倍,50倍,標記為樣品管4、5、6(樣品管4為50ul樣品+450ul樣品稀釋緩沖液,樣品管5為25ul樣品+475ul樣品稀釋緩沖液,樣品管6為10ul樣品+490ul樣品稀釋緩沖液)
三、預實驗
1、取出2排孔板
2、在第1排孔板中加入100ul標準管1、2、3、4、5、6、7、8,在第2排孔板中加入100ul樣品管1、2、3、4、5、6,使用微孔板振蕩器進行混勻
3、用平皿密封器覆蓋平皿,并在37℃孵育2小時
4、用稀釋劑A將檢測試劑A稀釋100倍,并充分混合
5、取下蓋子并丟棄液體,不洗板
6、將100 ul檢測試劑A工作溶液等分至每個孔中。用平皿密封器覆蓋平皿,并在37℃孵育1小時
7、取下蓋子并丟棄溶液。用1X清洗緩沖液清洗板3次
8、用稀釋劑B將檢測試劑B稀釋100倍,并充分混合
9、將100 ul檢測試劑B工作溶液等分至每個孔中,密封平板,并在37℃下孵育1小時
10、取下蓋子,丟棄溶液,清洗板5次
11、將90 ul TMB底物加入每個孔中,用板密封劑覆蓋板,使用微孔板振蕩器進行混勻,在37°C下遮光培養(yǎng)20分鐘
12、每個孔加入50ul終止液
13、立即測量450nm處的吸光度
問:稀釋了10倍、20倍、50倍,結果吸光度值都超出標準曲線范圍,什么原因導致?
答:大概率是稀釋倍數(shù)不夠導致。
廠家給的答復:從我們對人類血清樣本的測試來看,稀釋率在0-1:128的范圍內似乎適合這個試劑盒。根據(jù)這個范圍稀釋后結果仍不在標準曲線內
咱們技術給的答復:國內外的標本存在差異,建議稀釋500-1000倍再實驗看看結果
最終客戶稀釋1000倍在標準曲線內,保證了實驗的順利進行。