尿生殖竇植入復(fù)制前列腺增生動(dòng)物模型【北京動(dòng)物實(shí)驗(yàn)代做】

【造模機(jī)制】胚胎尿生殖宴的組成成分可能參與成年期前列腺增生的調(diào)節(jié)。植人胚胎尿生殖竇間質(zhì)促進(jìn)成年動(dòng)物尿道周圍胚胎前列腺組織重新恢復(fù)生成能力。胚胎尿生殖賽間質(zhì)誘導(dǎo)的前列腺增生過程,類似于人類胚胎 BPH 發(fā)生中的間質(zhì)-上皮相互作用機(jī)制。

【造模方法】

1、動(dòng)物和器材小鼠.常規(guī)手術(shù)器械—套、體視顯微鏡.麻醉用品(如戊***鈉)等。

2.模型制備成年雄鼠,1％戊***鈉 30mg/kg 腹腔注射麻醉成功后,妥善將鼠固定于操作臺(tái)。腹正中切開,暴露膀胱及前列腺,仔細(xì)分離前列腺腹葉,在體視顯微鏡下向前列腺腹葉內(nèi)植入 3 個(gè) 16 天胎齡同品系胎鼠的尿生殖竇組織,縫合腹壁。術(shù)后 4周即認(rèn)為前列腺增生模型建立。觀察指標(biāo)為前列腺體積、重量、前列腺指數(shù)及病理變化。

3.樣本采集和指標(biāo)測(cè)定尿生殖竇間質(zhì)的制備:取出孕 16～18 天的 BALB/c小鼠的胚胎,分離出完整的尿生殖竇,置于 1%的胰蛋白酶溶液,4℃,消化 120 分鐘,去掉上皮成分保留 UGM,用50%的小牛血清培養(yǎng)液清洗,終止胰蛋白酶的消化作用,保存于Dehank 培養(yǎng)液中,3 小時(shí)內(nèi)使用。

【模型特點(diǎn)】前列腺體積、重量、前列腺指數(shù)明顯增加。病理變化表現(xiàn)為:腺體及纖維組織增生,以腺體增生為主,腺腔圓形,腺上皮高柱狀,有增生,形成較多乳頭凸人腔內(nèi),腺腔內(nèi)分泌物增多,纖維間質(zhì)有增生。

【應(yīng)用范圍】該模型能較好地反映人類 BPH 的發(fā)生過程,且其簡(jiǎn)便易行,重復(fù)性好,誘導(dǎo)時(shí)間短,對(duì) BPH 病因探討和防治研究有更好的價(jià)值。

【注意事項(xiàng)】正確獲取 16 天胚齡胎鼠的尿生殖竇是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵之一,胎齡過小,尿生殖竇尚未發(fā)育分化,胎齡過大,則較大的尿生殖竇難于植人,且必須將一個(gè)完整的尿生殖竇全部植人,應(yīng)避免讓鑷子將尿生殖竇夾碎。另外,胎鼠的尿生殖竇誘導(dǎo)前列腺增生有雄激素依賴性,必須選用成年雄性小鼠(7～10 周齡)。增生程度與胚胎尿生殖竇植入的數(shù)目呈比例,所以每只小鼠植入的胎鼠尿生殖竇的數(shù)目必須相同。

【模型評(píng)價(jià)】鼠的前列腺導(dǎo)管分為遠(yuǎn)段、中段、近段,遠(yuǎn)段的上皮為高柱狀,基質(zhì)單層平滑肌,而近段上皮為高平或低柱狀,基質(zhì)平滑肌數(shù)層,由于間質(zhì)環(huán)境與上皮的這種區(qū)域性差別,構(gòu)成了間質(zhì)-上皮相互作用時(shí),對(duì)雄激素的反應(yīng)性不同。遠(yuǎn)段腺上皮表現(xiàn)為增生,而近段上皮表現(xiàn)為凋亡。

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