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Cortisol ELISA Kit皮質(zhì)醇ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)制劑方案

2023-07-13 16:19 作者:認(rèn)真搞科研的科研達(dá)人  | 我要投稿

DetectX?皮質(zhì)醇免疫測定試劑盒旨在定量測量干燥后的皮質(zhì)醇糞便提取物、唾液、尿液、血清、血漿和組織培養(yǎng)基樣品。請閱讀完整的試劑盒插入物。在提取的樣品和血清中測量總皮質(zhì)醇血漿和唾液和尿液中的游離皮質(zhì)醇。提供皮質(zhì)醇標(biāo)準(zhǔn)以生成化驗和所有樣品必須從用戶生成的標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀取。標(biāo)準(zhǔn)品或稀釋樣品移液到涂有抗體的透明微量滴定板中以捕獲小鼠抗體。將皮質(zhì)醇過氧化物酶綴合物加入到孔中。通過加入單克隆抗體引發(fā)結(jié)合反應(yīng)皮質(zhì)醇抗體。

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免疫反應(yīng)發(fā)生在添加量有限的抗皮質(zhì)醇單克隆抗體之間抗體,樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的皮質(zhì)醇抗原,以及添加的皮質(zhì)醇過氧化物酶的限量共軛。隨著樣本中皮質(zhì)醇濃度的增加,皮質(zhì)醇過氧化物酶的量共軛界減小導(dǎo)致信號減小,反之亦然。信號產(chǎn)生于皮質(zhì)醇過氧化物酶與抗皮質(zhì)醇抗體結(jié)合,而抗皮質(zhì)醇抗體本身與山羊抗小鼠IgG結(jié)合涂層板。過量的皮質(zhì)醇過氧化物酶不會與平板結(jié)合,并在之前從井中沖洗出來添加基質(zhì)。

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孵育一小時后,洗滌板并加入基質(zhì)?;|(zhì)與結(jié)合物反應(yīng)皮質(zhì)醇過氧化物酶偶聯(lián)物。短時間孵育后,反應(yīng)停止在微量滴定板讀取器中以450nm波長檢測產(chǎn)生的顏色。在對樣品稀釋度進(jìn)行適當(dāng)校正后,使用大多數(shù)讀板器都可以使用的軟件。

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所需的其他材料:

蒸餾水或去離子水。

帶有一次性尖端的重復(fù)移液管,能夠分配25μL、50μL和100μL。

比色96孔微孔板讀數(shù)器,能夠讀取450 nm下的光密度。

轉(zhuǎn)換來自讀板器的原始相對光密度讀數(shù)并執(zhí)行四個參數(shù)的軟件

logistic曲線(4PLC)擬合。有關(guān)詳細(xì)信息,請聯(lián)系您的讀板器制造商。

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注意事項

與所有此類產(chǎn)品一樣,該試劑盒只能由具有實驗室安全性的合格人員使用指示在嘗試使用該產(chǎn)品之前,應(yīng)閱讀并理解完整的說明書。

抗體包被板需要干燥保存。鋁箔拉鏈中包含的硅膠包袋子可以使盤子保持干燥。如果拉鏈未關(guān)閉,硅膠包裝將從藍(lán)色變?yōu)榉奂t色正確地該試劑盒采用基于過氧化物酶的讀出系統(tǒng)。緩沖液包括其他制造商的洗滌緩沖液,含鈉

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艾美捷皮質(zhì)醇ELISA試劑盒#K003-H1樣本類型:

皮質(zhì)醇在所有物種中都是相同的,該試劑盒將測量來自人類以外來源的皮質(zhì)醇。這個最終用戶應(yīng)評估其他樣本中皮質(zhì)醇的回收率。該測定已針對唾液進(jìn)行了驗證,尿液、血清和EDTA和肝素血漿以及用于組織培養(yǎng)樣品。已通過干燥驗證糞便提取物樣品。含有顆粒物的樣品應(yīng)在使用前進(jìn)行離心處理。中等至嚴(yán)重溶血的樣品不應(yīng)用于該試劑盒。

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標(biāo)準(zhǔn)制劑:

將試管標(biāo)記為#1至#7。用移液管將450μL的測定緩沖液移到試管中#1和250μL注入#2至#7號管中。皮質(zhì)醇儲備溶液含有一種有機溶劑。預(yù)先沖洗移液管尖端數(shù)次,以確保準(zhǔn)確交付。小心地將50μL皮質(zhì)醇儲備溶液加入1號管和完全渦流。在試管中取250μL皮質(zhì)醇溶液#1,并將其添加到#2管中,使其完全渦旋。重復(fù)系列稀釋用于#3至#7號管。試管中皮質(zhì)醇的濃度為3200、1600、800、400、200、100和50微克/毫升。

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