皮質(zhì)醇ELISA試劑盒性能：

中文名稱：皮質(zhì)醇ELISA試劑盒

英文名稱：Cortisol ELISA Kit

檢測(cè)范圍：0.375nmol/L~12nmol/L。

靈敏度：0.1。

特異性：僅用于科研不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%?，板間變異系數(shù)小于15%?。

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艾美捷皮質(zhì)醇ELISA試劑盒#K003-H1操作流程如下：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液?100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液?100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm?吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的?OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品僅用于科研。

皮質(zhì)醇ELISA試劑盒組成：

1：預(yù)包被板: 96T/48T

2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化?0.4mL x 1

3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2

4：EIA緩沖液:?含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5：標(biāo)記抗體稀釋液:?含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6：顯色劑: TMB底物液?15mL x 1

7：終止液: 1N硫酸?12mL x 1

8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮)?含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1