瑞禧生物小編今天整理了馬齒莧多糖偶聯(lián)順鉑復(fù)合物/黃連素偶聯(lián)順鉑化合物/載順鉑mPEg-PGA納米微球制備方法，一起來看！

黃連素偶聯(lián)順鉑化合物制備方法:

以A549/DDP細(xì)胞為研究對象,分別加入12 μg/mL的順鉑,濃度為20 μmol/L,40 μmol/L,80 μmol/L的黃連素+12 μg/mL的順鉑,設(shè)置空白對照孔(PBS孔),分別用藥物干預(yù)24 h,48 h,72 h,采用MTT法檢測細(xì)胞增殖活性;各組用藥干預(yù)48 h后,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡,Western blot 法檢測Caspase-3,Caspase-9,Bax,Bcl-2的蛋白表達(dá)情況,Real-time PCR法檢測Caspase-3,Caspase-9,Bax,Bcl-2的mRNA表達(dá)水平.不同濃度的黃連素聯(lián)合順鉑使促凋亡相關(guān)基因Caspase-3,Caspase-9,Bax在蛋白和mRNA水平表達(dá)上調(diào)(P<0.05)。

載順鉑mPEg-PGA納米微球的制備：
以甲氧基聚乙二醇(mPEG 5000)為原料,采用Gabriel法制得甲氧基-聚乙二醇胺(mPEG-NH2),用Fuchs-Farthing光氣法制得L-谷氨酸5-芐酯N-羧基環(huán)內(nèi)酸酐(L-Glu (Z)-NCA),再以mPEG-NH2為大分子引發(fā)劑引發(fā)NCA開環(huán)聚合,經(jīng)酸解脫去了聚合物側(cè)鏈的芐氧羰基保護(hù)基,合成了兩親嵌段共聚物mPEG-PGA.產(chǎn)物用FT-IR,1HNMR,GPC,CMC等進(jìn)行了表征.(2)制備了mPEG-PGA聚合物納米顆粒,載順鉑mPEG-PGA納米顆粒以及載順鉑mPEG-PGA-BSA偶聯(lián)物,用透射式電子顯微鏡(TEM)和廣角激光光散射儀(DLS)等方法對納米顆粒的粒徑大小及形態(tài)進(jìn)行了研究.結(jié)果表明所制備的聚合物納米顆粒絕大部分具有核/殼結(jié)構(gòu),TEM測得的粒徑尺寸為25-35 nin,DLS測得的粒徑尺寸為90-120 nm.

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