全球首發(fā)丨MobiCube 單細胞兔V(D)J試劑盒填補兔單細胞免疫組庫研究空白
北京博奧晶典生物技術(shù)有限公司(以下簡稱“博奧晶典”)與墨卓生物開展深度合作,引進了 MobiNova?-100 高通量單細胞建庫系統(tǒng),強勢推出了國產(chǎn)化的單細胞轉(zhuǎn)錄組、單細胞免疫組庫等技術(shù)服務(wù),為單細胞領(lǐng)域的研究提供了更加全面、更加穩(wěn)定和更高性價比的解決方案。墨卓生物在推出了 MobiCube??高通量單細胞 V(D)J 試劑盒、3’ 轉(zhuǎn)錄組 V2.0 試劑盒之后,又首發(fā)上市了 MobiCube??高通量單細胞兔 V(D)J 產(chǎn)品,這是全球范圍內(nèi)第一款兔 V(D)J 商業(yè)化試劑盒,可廣泛用作臨床診斷,疫苗研發(fā),免疫學(xué)研究,藥物研發(fā)等。
單克隆抗體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,其中源于兔的單克隆抗體因高親和力、高特異性和識別更多抗原表位等優(yōu)勢,受到單克隆抗體篩選研究人員的關(guān)注。
單克隆抗體常見篩選方法為雜交瘤技術(shù)和噬菌體展示技術(shù),但兩項技術(shù)均存在篩選效率低、篩選周期過長的不足,這也是限制抗體開發(fā)速度的因素之一。
如何縮短周期,提高抗體篩選效率是加速兔抗體開發(fā)的關(guān)鍵。高通量單細胞 V(D)J 全長測序可一次完成上萬單細胞的 mRNA 捕獲,單次實驗即可獲得數(shù)萬 B 細胞的 V(D)J 全長序列,直接對接下游抗體序列合成,進而顯著縮短抗體篩選周期及提高篩選效率。該技術(shù)也因此獲得很多抗體篩選 CRO 公司的青睞。
產(chǎn)品介紹
MobiCube??高通量單細胞 V(D)J 試劑盒(兔)基于微流控技術(shù),可同時對每個細胞完成 mRNA 分子的捕獲,并在此過程中給捕獲的 mRNA 分子打上細胞特異性分子標簽。完成 mRNA 分子捕獲后,通過逆轉(zhuǎn)錄和 NGS 文庫構(gòu)建,即可獲得單個細胞的轉(zhuǎn)錄組信息。
與此同時,以逆轉(zhuǎn)錄獲得的 cDNA 為模板,可通過多重 PCR 或巢式 PCR 獲得每個細胞內(nèi)的全長 VDJ 序列信息。
產(chǎn)品應(yīng)用

墨卓生物高通量單細胞 V(D)J(兔)測序平臺,可結(jié)合流式細胞術(shù)/免疫磁珠分選等方法,先從兔 PBMC 或者脾臟等樣本中分選得到 B 細胞,再用墨卓的高通量單細胞 V(D)J 測序平臺,完成單 B 細胞的 VDJ 測序,一周內(nèi)即可快速獲得候選抗體序列。
當然作為高通量單細胞平臺,客戶也可以獲得單細胞懸液后,直接進行高通量單細胞轉(zhuǎn)錄組文庫構(gòu)建及測序。因為通過轉(zhuǎn)錄組信息,墨卓可以幫客戶高效鑒定樣本中的 B 細胞,同時給出對應(yīng)的 VDJ 序列信息。
數(shù)據(jù)表現(xiàn)
●模擬真實場景的數(shù)據(jù)表現(xiàn)
為了模擬流式細胞術(shù)/免疫磁珠分選后得到細胞數(shù)較少的真實場景,墨卓將投入細胞量調(diào)整至 8000 個,進行本次測試,對于客戶關(guān)心的 B 細胞也重點進行了測試。
在此情況下,通過 5’ 端轉(zhuǎn)錄組測序識別到 4,002 個細胞,中值基因數(shù)在 1,375。


細胞注釋圖
在此樣本中捕獲 B 細胞 2,710 個,其中重輕鏈成功配對率達到 85.6%。這些細胞都可以拿到全長的 V(D)J 序列信息,構(gòu)建抗體表達載體,用于生產(chǎn)抗體。


BCR映射圖
●令人安心的穩(wěn)定性
同樣在投入低細胞的情況下進行穩(wěn)定性測試。將一份 PBMC 樣本一分為二,在兩臺 MobiNova?-100 儀器上進行測試。結(jié)果顯示,兩組實驗的細胞分群圖高度重疊,在投入 5000 個細胞的情況下,捕獲細胞數(shù)為 2301,2501,中值基因數(shù)分別為 1006,1008。從細胞分群、捕獲細胞數(shù)、中值基因數(shù)上均表現(xiàn)出高重復(fù)性。
2 次獨立測試,兔 PBMC 樣本 5 端轉(zhuǎn)錄組圖譜高度重復(fù)

獨立測試1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?獨立測試2
VDJ 數(shù)據(jù)分析結(jié)果也顯示,兩組測試的 BCR 富集效果高度可重復(fù),同時, BCR 的重輕鏈配對率均達到?80%?以上。

關(guān)于博奧晶典
博奧晶典科研服務(wù)擁有一支高素質(zhì)、經(jīng)驗豐富的專業(yè)技術(shù)團隊,一直以顧客為中心,以堅持科技領(lǐng)先,服務(wù)完善,注重細節(jié),質(zhì)量穩(wěn)定為基本點,提供創(chuàng)新、完善的整體解決方案。在20多年的科研服務(wù)過程中,一貫秉承高質(zhì)量的專業(yè)技術(shù)服務(wù)精神,自主開發(fā)和引進了一系列先進的高通量篩選和驗證平臺,為國內(nèi)外眾多的科研院所提供科研服務(wù),支持國內(nèi)外科研機構(gòu)及企事業(yè)單位發(fā)表 SCI 論文超過2500篇,雜志總影響因子超過13000分,文章領(lǐng)域涉及基因組、表觀基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組、微生物組、系統(tǒng)生物學(xué)等多個技術(shù)領(lǐng)域。
關(guān)于墨卓
創(chuàng)新驅(qū)動、卓鑒未來,墨卓生物創(chuàng)立于美國波士頓,落地中國浙江,匯集了由國際一流科學(xué)家和跨國醫(yī)療器械公司高管等組成的一批優(yōu)秀人才。墨卓致力于用創(chuàng)新微流控和單細胞測序技術(shù)賦能科學(xué)研究與精準醫(yī)療。目前已經(jīng)成為擁有微流控、測序、生化、硬件開發(fā)、生信等關(guān)鍵技術(shù),推出單細胞測序與數(shù)字PCR雙技術(shù)平臺,在液體活檢、伴隨診斷、生命科學(xué)研究等多領(lǐng)域并行發(fā)展的科研+IVD解決方案領(lǐng)跑者。