1 用戶背景介紹

勃林格殷格翰(Boehringer-Ingelheim)是一家致力于人類生物制藥化學和動物健康產(chǎn)品的醫(yī)藥公司，也是世界上最大的私有制藥企業(yè)。名列全球前20位，高度研發(fā)驅動的領先醫(yī)藥公司，核心業(yè)務是包括處方藥、 動物保健和生物制藥，業(yè)務范圍遍及全國各主要省市和地區(qū)。主要的研究領域包括：免疫及呼吸疾病、心血管及代謝疾病、中樞神經(jīng)疾病、腫瘤。

勃林格殷格翰成為第一家跨國公司在中國建立生物藥物的制造企業(yè)。2014年，與百濟神州簽署戰(zhàn)略合作協(xié)議，為其臨床試驗提供生物制藥的生產(chǎn)。同年底，生物制藥中試生產(chǎn)車間在上海張江工廠落成。2020年6月，勃林格殷格翰日前啟動跨國藥企在華首個外部創(chuàng)新合作中心。該中心采用了跨國藥企中首個“三合一”業(yè)務模式，即集學術合作、業(yè)務拓展及許可、風險投資于一體。此舉將整合公司的創(chuàng)新經(jīng)驗和合作伙伴在各自相關領域的獨特技術和專業(yè)技能，共同開發(fā)創(chuàng)新藥物和療法，進而惠及更多患者。

2?為什么早期發(fā)現(xiàn)對蛋白質科研人員至關重要？

單克隆抗體（mAb）是當今治療性生物制劑的主要成分。由于其高度特異性和效力，它們被用于治療多種疾病-從不同的癌癥類型到自身免疫缺陷。新的蛋白質工程方法導致越來越多的治療性mAb，它們還可以被修飾為雙特異性、與其他生物制劑結合或用小分子藥物修飾。

而單克隆抗體（mAb）等生物藥物的數(shù)量不斷增加，以及mAb 變體之間的豐富異質性，需要一個徹底的開發(fā)過程，以最大限度地提高mAb的法規(guī)遵從性。因此，在開發(fā)過程的早期階段就需要生物物理分析方法，以指導和簡化進一步的抗體處理，并預測抗體的開發(fā)能力。

抗體的構象和膠體穩(wěn)定性是預測其穩(wěn)定性和可開發(fā)性的關鍵參數(shù)，因為它們影響長期儲存穩(wěn)定性。開發(fā)管道中mAb和mAb變體的數(shù)量不斷增加，需要使用能夠快速評估這些參數(shù)的生物物理方法。

在開發(fā)的早期階段篩選條件和抗體構建體旨在確定最有希望的候選物，以滿足藥物批準的監(jiān)管要求。在本案例中，勃林格殷格翰使用治療性單克隆IgG1抗體的小規(guī)模配方篩選，以驗證PR NT.48在確定關鍵穩(wěn)定性參數(shù)方面的優(yōu)異能力。

通過PR NT.48搭載的nanoDSF技術跟蹤色氨酸熒光發(fā)射的變化來評估熱梯度中mAb構象穩(wěn)定性。同時，PR NT.48可以檢測膠體穩(wěn)定性的變化和溫度引起的聚集，是通過檢測兩次通過樣品的光束的背反射強度實現(xiàn)的（圖1）。

(左) 光通過毛細管，被反向反射到檢測器，光強度被量化。

(右) 粒子散射光，導致入射光的消光和背反射光的反射--蛋白質聚集的直接測量。

使用PR NT.48同時進行背向反射和熒光分析提供了幾個重要信息：

可直接關聯(lián)熱穩(wěn)定性和膠體穩(wěn)定性，這意味著可以識別引起聚集的展開事件，更重要的是，可以確定聚集起始溫度。

可確定抗體的未折疊狀態(tài)的總體聚集程度，這在不同的配方和抗體類型之間可能有顯著差異。

3?下載應用指南

讓我們一起來看看勃林格殷格翰的開發(fā)團隊_Global Formulation Development group，如何借助PR NT.48預測配方篩選中mAb的長期穩(wěn)定性，生物制劑在熱梯度中的構象和膠體穩(wěn)定利用熱穩(wěn)定性信息與聚集(膠體穩(wěn)定性)監(jiān)測相結合，為其單克隆抗體尋找理想的緩沖條件。

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通過本篇應用案例，您將了解到:

1 為什么配方優(yōu)化對治療性單克隆抗體的長期穩(wěn)定性至關重要？

2 勃林格殷格翰如何進行制劑穩(wěn)定性研究？

3 為什么多重穩(wěn)定性方面的組合評估對于深入了解緩沖液配方對穩(wěn)定性的影響至關重要？