Abbexa小鼠補(bǔ)體C5的ELISA試劑盒檢測(cè)原理
補(bǔ)體是一種血清蛋白質(zhì),存在于人和脊椎動(dòng)物血清及組織液中,不耐熱,活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)??杀豢乖?抗體復(fù)合物或微生物所激活,導(dǎo)致病原微生物裂解或被吞噬。可通過三條既獨(dú)立又交叉的途徑被激活,即經(jīng)典途徑、旁路途徑和凝集素途徑。
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高等哺乳動(dòng)物的補(bǔ)體系統(tǒng)有三條激活途徑:經(jīng)典途徑、替代途徑以及凝集素途徑。在生物的進(jìn)化過程中,替代途徑應(yīng)是zui早出現(xiàn)的;其次應(yīng)該是凝集素途徑,而經(jīng)典途徑應(yīng)該出現(xiàn)得zui晚。
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補(bǔ)體成分C5(通常縮寫為C5)是補(bǔ)體的第五成分,是補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的一部分,在炎癥和細(xì)胞殺傷過程中起重要作用。它在血清中被發(fā)現(xiàn)是一種失活的蛋白質(zhì),該蛋白質(zhì)由二硫鍵連接的α和β多肽鏈組成,但可以被兩種不同的C5轉(zhuǎn)化酶(C4b2b3b或C3bBb3b)中的一種裂解成兩種活性肽(C5a和C5b)。一旦裂解,C5a片段將作為一種過敏毒素,它是通過C5轉(zhuǎn)化酶的裂解從α多肽衍生而來的,可與各種白細(xì)胞表面的C5a受體結(jié)合并觸發(fā)免疫激活。C5b導(dǎo)致下游補(bǔ)體蛋白(C6-C9)在病原體表面形成攻膜復(fù)合物(MAC)。C5的突變和缺陷與嚴(yán)重的反復(fù)感染有關(guān)。

案例分析——Abbexa小鼠補(bǔ)體C5的ELISA試劑盒
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以abx153740小鼠補(bǔ)體C5的ELISA試劑盒為例:
小鼠補(bǔ)體C5的ELISA試劑盒是用于體外定量測(cè)量血清,血漿和其他生物液中小鼠補(bǔ)體C5濃度的ELISA試劑盒。該測(cè)定法對(duì)補(bǔ)體C5的檢測(cè)具有很高的靈敏度和出色的特異性。

小鼠補(bǔ)體C5的ELISA試劑盒檢測(cè)原理:該試劑盒基于夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)。將抗體預(yù)包被到96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)試樣品和生物素偶聯(lián)試劑添加到孔中并孵育。然后加入結(jié)合了HRP的試劑,并孵育整個(gè)板子。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后,只有含有足夠C5的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與板上的C5含量成正比。在酶標(biāo)儀中于450nm處以分光光度法測(cè)量光密度(OD),由此可計(jì)算出C5的濃度。

小鼠補(bǔ)體C5的OD值標(biāo)曲——廠家驗(yàn)證
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文章來源:
補(bǔ)體C5分析——Abbexa小鼠補(bǔ)體C5 ELISA試劑盒
https://www.amyjet.com/featured/c5-elisa.shtml
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