Worthington解離酶:胰蛋白酶及常見問題
艾美捷Worthington基本概況:
胰蛋白酶是一種胰腺絲氨酸蛋白酶,對涉及堿性氨基酸、精氨酸和賴氨酸的羧基的肽鍵具有特異性。胰蛋白酶是已知的特異性最高的蛋白酶之一,盡管它也表現(xiàn)出一些酯酶和酰胺酶活性。
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單獨純化的胰蛋白酶通常對組織解離無效,因為它對細胞外蛋白幾乎沒有選擇性。純化的胰蛋白酶和其他酶如彈性蛋白酶和/或膠原酶的組合已證明對解離有效。
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“胰蛋白酶”也是商業(yè)供應商對胰酶的名稱,胰酶是從豬胰腺中提取的蛋白酶、多糖酶、核酸酶和脂肪酶的粗混合物。NF 1:250?是一種常用的“胰蛋白酶”制劑,在國家處方集規(guī)定的測定條件下,它具有蛋白水解消化?250?倍于其重量的酪蛋白的能力。重要的是要認識到這種測定程序?qū)σ鹊鞍酌笡]有特異性,盡管胰酶確實含有這種酶。盡管有命名法,但像?NF 1:250?和?1:300?這樣的粗制“胰蛋白酶”被廣泛用于解離組織,這可能是因為胰蛋白酶和污染性蛋白水解和多糖酶活性確實會優(yōu)先攻擊細胞外基質(zhì)。
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在組織培養(yǎng)實驗室中,研究人員使用純化的胰蛋白酶將細胞從培養(yǎng)容器內(nèi)表面上生長的單層釋放到懸浮液中。大多數(shù)源自正常組織且不高度適應人工培養(yǎng)條件的細胞以單層形式生長,即粘附在培養(yǎng)容器內(nèi)表面上的一層細胞厚度為一個細胞。由于此類細胞更像正常組織中的細胞,因此許多組織培養(yǎng)研究人員正在研究在單層培養(yǎng)中生長的細胞。
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單層培養(yǎng)物通常在玻璃或聚苯乙烯滾瓶、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中生長。用于組織培養(yǎng)工作的塑料容器經(jīng)過特殊處理,以確保細胞良好地粘附在容器壁上。
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用于細胞分離程序的一些J常用的純化胰蛋白酶等級是?艾美捷Worthington?代碼:TL、TRL、TRLS?和?TRLVMF。這些適用于細胞收獲以及組織解離。
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組織表(參考,按組織類型和物種分組)
脂肪/脂肪?腎上腺?骨?腦
軟骨?冒號?內(nèi)皮?上皮
眼睛?心?腸?腎
肝?肺?淋巴結(jié)?乳腺
各種各樣的?肌肉?神經(jīng)?胰腺
腮腺?垂體?前列腺?生殖
秤?皮膚?脾?干
胸腺?甲狀腺/甲狀旁腺?扁桃體?瘤
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需要注意的是:一般而言,Worthington?提供的組織解離酶可互換用于所引用的大多數(shù)制劑。
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Worthington核心酶:包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
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Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。