蛋白糖檢測
蛋白糖是指發(fā)生了糖基化修飾的蛋白質(zhì),也稱糖蛋白。蛋白糖檢測主要就是鑒定一個蛋白質(zhì)是否發(fā)生了糖基化修飾。?
糖蛋白檢測可以通過分離富集糖基化蛋白質(zhì)的技術(shù)來實現(xiàn),如凝集素親和技術(shù)、肼化學(xué)富集法以及凝膠色譜技術(shù)等。?
凝集素可以專一性識別并結(jié)合某一特異性的單糖或寡糖中特定的糖基序列。含糖蛋白的蛋白質(zhì)樣品或經(jīng)酶切的聚糖肽可以按照順序通過多種凝集素親和色譜柱,從而篩選出不同的聚糖蛋白或聚糖肽,用于后續(xù)的檢測分析。?
肼化學(xué)富集法利用高氯酸鹽將糖基上的鄰二醇氧化成醛,醛基能與固定在樹脂上的肼共價結(jié)合,經(jīng)過洗脫程序,富集在樹脂上的蛋白質(zhì)就是發(fā)生了糖基化。?
凝膠色譜法通過利用凝集素或抗體親和技術(shù)使糖蛋白帶上相應(yīng)標(biāo)記,再通過色譜柱進(jìn)行洗脫富集。色譜法基于其快速、準(zhǔn)確、分辨率高且穩(wěn)定性好等特點,已成為糖蛋白鑒定的理想技術(shù)。?
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