通過 TTC 染色觀察梗死病變及梗死體積。
材料與儀器
2,3,5-三苯基氯化四氮唑溶液；冠狀切片腦槽，刀片；戊巴比妥鈉；注射器；取腦手術(shù)器械。
步驟
1.MCAO 誘導(dǎo)一定時間后（根據(jù)實驗者需求），麻醉小鼠，斷頸取出大腦，將腦放入腦槽中。放入 -80°C 冰箱 1-2 min，將大腦稍凍硬一點。
2.將大腦冠狀切片為四個 2mm 切片，注意不要損壞腦片完整性。
3.將腦片放入 2% TTC 溶液（PBS 溶解）中，避光放入 37°C 恒溫箱 15min，中途可搖晃腦片使得染色均勻。
4.將染色完畢的腦片放入 4% 福爾馬林溶液，固定保存用于后續(xù)定量檢測梗死區(qū)域。
注意事項
1.TTC 染色應(yīng)全程避光。
2.動物取材不需要灌流取材，直接取出大腦即可。
3.在做腦槽切片時，提前將腦子凍一下更好切，不易損壞。

常見問題
1.切腦片的時候大腦容易損壞怎么辦？
答：腦槽中要保證無水，大腦取出要迅速放進腦槽，并快速放入 -80°C 冰箱 1-2min，在取出腦片的時候，要兩個刀片一起抬出較容易將腦片從腦槽中取出。
2.TTC 染色怎么沒有白色梗死區(qū)域？
答：考慮 MCAO 造模是否成功，是否 37°C 染色 15min，并且整個染色過程一定要避光。