穩(wěn)轉(zhuǎn)株是指通過基因工程手段獲得穩(wěn)定過表達(dá)或抑制特定基因的細(xì)胞株。一般將目的基因序列或抑制目的基因的shRNA序列裝載至重組載體中，再通過慢病毒系統(tǒng)或轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將目的序列整合至宿主細(xì)胞的染色體中，實(shí)現(xiàn)目的基因持續(xù)、穩(wěn)定的調(diào)控。

穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株被廣泛應(yīng)用于基因功能研究、小鼠疾病模型建立、小分子藥物和抗體藥開發(fā)等場(chǎng)景。賽業(yè)生物建立了一套成熟穩(wěn)定的基因干擾和過表達(dá)的實(shí)驗(yàn)體系，針對(duì)多種不同細(xì)胞（包括難轉(zhuǎn)染細(xì)胞），均可提供穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建服務(wù)。

賽業(yè)生物穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株全流程構(gòu)建服務(wù)

01

服務(wù)內(nèi)容

??基因編輯細(xì)胞株

??體外檢測(cè)

02

成功基因編輯細(xì)胞類型精選

03

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

?豐富的成功經(jīng)驗(yàn)

超千例項(xiàng)目成功案例，超250種靶細(xì)胞經(jīng)驗(yàn)，客戶多篇文獻(xiàn)引用發(fā)表。

?多種轉(zhuǎn)染或感染方式

慢病毒、PB轉(zhuǎn)座子等多種策略。

?高調(diào)控效率和性狀穩(wěn)定

可實(shí)現(xiàn)幾十、百倍的過表達(dá)水平，經(jīng)過十幾代甚至更高的細(xì)胞傳代后，仍然維持穩(wěn)定的過表達(dá)性狀。

?豐富多樣的體外檢測(cè)

提供從基因、mRNA、蛋白到功能等全套體外檢測(cè)服務(wù)。

?嚴(yán)格的質(zhì)控體系

雙重檢測(cè)細(xì)菌、支原體等微生物，100%確保無污染；進(jìn)行細(xì)胞活率檢測(cè)，保證交付質(zhì)量。

?細(xì)胞到動(dòng)物的整體服務(wù)方案

提供從細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞功能驗(yàn)證、小鼠疾病模型建立到表型分析的全套服務(wù)。

04

服務(wù)案例

??腫瘤模型細(xì)胞株構(gòu)建

（A . Luciferase assay結(jié)果：luciferase高表達(dá)1000倍以上，顯示成功構(gòu)建MCF-7/luciferase細(xì)胞株；B. MCF-7/luc細(xì)胞株接種小鼠體內(nèi)成像：顯示MCF-7/luciferase細(xì)胞株可以在體內(nèi)成瘤；C. 取骨后熒光成像：顯示成功構(gòu)建乳腺癌骨轉(zhuǎn)移模型。）

??抗原表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建

K562過表達(dá)細(xì)胞株相比于對(duì)照細(xì)胞有一個(gè)log shift的位移，且陽性率為99.86%，表明成功構(gòu)建K562過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株。

??誘導(dǎo)型過表達(dá)細(xì)胞株構(gòu)建

基因A過表達(dá)細(xì)胞株在DOX誘導(dǎo)下，相比于對(duì)照細(xì)胞有10倍以上表達(dá)，表明成功構(gòu)建基因A誘導(dǎo)型過表達(dá)株。

??體外藥效評(píng)價(jià)服務(wù)

（A. CD19 CAR分子結(jié)構(gòu)圖示；B. CD19 CAR-T細(xì)胞陽性率檢測(cè)結(jié)果；C. Nalm6細(xì)胞CD19抗原陽性率檢測(cè)結(jié)果；D. CD19 CAR-T殺傷Nalm6細(xì)胞實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，顯示CD19 CAR-T細(xì)胞對(duì)Nalm6細(xì)胞具有顯著增強(qiáng)的殺傷作用；E. 殺傷實(shí)驗(yàn)上清中IFN-γ含量檢測(cè)結(jié)果，顯示同Nalm6細(xì)胞共孵育后CD19 CAR-T細(xì)胞的IFN-γ分泌能力均顯著增強(qiáng)。）

賽業(yè)生物Smart-CRISPR?細(xì)胞基因編輯系統(tǒng)

Smart-CRISPR?細(xì)胞基因編輯系統(tǒng)基于AlphaKnockout基因打靶專家系統(tǒng)，借助強(qiáng)大的天河二號(hào)進(jìn)行大規(guī)模超強(qiáng)度運(yùn)算，將基因編輯細(xì)胞株的方案設(shè)計(jì)過程進(jìn)行人工智能化。只需輸入需要敲除的基因信息，系統(tǒng)會(huì)根據(jù)生物信息學(xué)算法，即可得到設(shè)計(jì)完善的方案，幫助研究人員輕松實(shí)現(xiàn)移碼突變、片段敲除、多基因敲除等多種敲除策略。