一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1．觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。

2．掌握ABO血型鑒定的原理。

3.學(xué)習(xí)辨別血型的方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

*血型：是對(duì)血液分類的方法，血細(xì)胞（紅細(xì)胞）膜上存在的特異抗原性物質(zhì)的類型。

*血型分類的依據(jù)是紅細(xì)胞表面是否存在某些可遺傳的抗原物質(zhì)。

*紅細(xì)胞凝集Agglutination：血型不相容的血液混合后，其中的紅細(xì)胞聚集成簇并溶血。

*造成凝集的機(jī)制是抗原-抗體反應(yīng)

*紅細(xì)胞表面上含有的特異性糖蛋白抗原物質(zhì)統(tǒng)稱為 凝集原Agglutinogen。

*在血漿中則含有與之相應(yīng)的特異性抗 體，稱為凝集素Agglutinin。

*已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并為國際輸血協(xié)會(huì)承認(rèn)的血型系統(tǒng)有30種，包括超過600種抗原，其中大部分都非常罕見，最重要的兩種為“ABO血型系統(tǒng)”和“Rh血型系統(tǒng)”。

*血型系統(tǒng)對(duì)輸血具有重要意義，以不相容的血型輸血可能導(dǎo)致溶血反應(yīng)的發(fā)生，造成溶血性貧血、腎衰竭、休克以至死亡。

*1901年Landsteiner首先發(fā)現(xiàn)血型系統(tǒng)

*A、B抗原的前體物質(zhì)是H抗原，受H基因控制，H基因產(chǎn)物為L-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶-1

*IA基因產(chǎn)物為N-乙酰-D-半乳糖胺轉(zhuǎn)移酶，IB基因產(chǎn)物為D-半乳糖轉(zhuǎn)移酶

*隱性純合體hh個(gè)體，特殊的O型——孟買型。

*按一般血型遺傳規(guī)律，O型和AB型雙親只能生下A型或B型子女。而在深圳，一對(duì)O型和AB型夫婦生下了罕見的O型和AB型的孩子。

≡血型與性格

*A型人小時(shí)候比較任性，年輕時(shí)性格果斷剛毅，時(shí)時(shí)處處要強(qiáng)。走向社會(huì)后，隨著年齡的增長和社會(huì)經(jīng)驗(yàn)的積累，他們開始克制自己的情緒，表現(xiàn)出穩(wěn)重謙虛的態(tài)度，容易成為不愿過份表現(xiàn)自己的謹(jǐn)慎派。A型人在老年時(shí)，則顯得很固執(zhí)。

*B型人大都有一個(gè)天真浪漫的幼年期，隨著年齡的增長，逐漸分成心直口快和不擅交際應(yīng)酬型兩種傾向。B型人由于性格自幼到老變化不大，相對(duì)來說會(huì)讓人感到他們?cè)交钤侥贻p。

*O型人年少時(shí)比較溫順，但隨著年齡的增長，他們會(huì)積極地呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的自我主張和自我表現(xiàn)，甚至成為非常有魄力的人。O型人從小至老的變化是最大的，往往是少年溫順，老來強(qiáng)硬。AB型人大多小時(shí)候怕陌生人，很閉塞，但長大以后善交朋友，交際廣泛。

*AB型人因過于自信，容易自滿，老年時(shí)給人感覺很傲慢。 不過他們兼具A型與B型的特質(zhì)，做事有計(jì)劃，但沒有耐性，容易沖動(dòng)，直覺敏銳，不喜歡墨守成規(guī)，性情多變，有時(shí)表現(xiàn)極端的個(gè)性。善于待人接物，很注意合情合理性，討厭口是心非的人，具有強(qiáng)烈的批評(píng)精神。 AB型是不講人情，不談愛情的，男女關(guān)系在AB型看來是件極具單純的事情，不會(huì)像其他血型的人弄得那樣復(fù)雜 。

≡血型的成因

①人類的血型是由飲食和進(jìn)化決定的。

②O 狩獵血型

③A 農(nóng)耕血型

④B 游牧血型

⑤AB 混合血型

≡血型鑒定（正定型法）

用已知的IgM類特異抗體（標(biāo)準(zhǔn)血清）與被檢紅細(xì)胞在室溫條件下、鹽水介質(zhì)中反應(yīng)，根據(jù)紅細(xì)胞是否出現(xiàn)凝集現(xiàn)象來測(cè)定被檢紅細(xì)胞膜上有無與血型抗體相對(duì)應(yīng)的抗原，從而判斷和鑒定被檢者的血型。

≡RH血型系統(tǒng)

*人類紅細(xì)胞含有一種與恒河猴 ?Rhesus macacus的紅細(xì)胞相同的凝集原稱為Rh 因子

*含Rh因子(8種，主要是D抗原)──Rh陽性

*不含Rh因子──Rh陰性

≡Rh血型的臨床意義

①輸血溶血

②新生兒溶血

三、實(shí)驗(yàn)器材與試劑

*載玻片、記號(hào)筆、刺血針、消毒牙簽、酒精棉球、干棉球

*A型和B型標(biāo)準(zhǔn)血清

*離心機(jī)、 顯微鏡

四、實(shí)驗(yàn)步驟

（1）標(biāo)記玻片：取潔凈的載玻片或白瓷板1塊，用蠟筆畫出小格，標(biāo)明抗A、抗B。

（2）加標(biāo)準(zhǔn)抗血清：在玻片已標(biāo)記的區(qū)域內(nèi)分別滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清各l滴。

（3）加被檢紅細(xì)胞：在滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清的小格中分別加被檢者血液各1滴，不斷輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)玻片或用牙簽使血清與紅細(xì)胞充分混勻，連續(xù)約1～5 min，室溫放置15～30min。（4）觀察結(jié)果：肉眼觀察有無凝集(或溶血)反應(yīng)，再用低倍鏡觀察，判定陰性、陽性和陽性強(qiáng)度。

?凝集判斷標(biāo)準(zhǔn)：如紅細(xì)胞呈均勻分布，無凝集顆粒，顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在，無凝集靠攏現(xiàn)象為陰性；紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集為陽性。

五、注意事項(xiàng)

1．所用器材必須干燥清潔、防止溶血；為避免交叉污染，各器皿均一次性使用為佳。

2．被檢血液標(biāo)本新鮮，無細(xì)菌污染。。

3．玻片等均應(yīng)嚴(yán)格標(biāo)記。

4．分型血清質(zhì)量性能合格，從冰箱取出待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存，減少細(xì)菌污染；一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞。

5.? 玻片法定型時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)玻片動(dòng)作要輕。注意防止懸液干涸，以免將玻片邊緣干涸引起的紅細(xì)胞凝集誤認(rèn)為抗原抗體反應(yīng)凝集。玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10 min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。

6.? 理論上IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫(20°C～24°C)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，37°C可使反應(yīng)減弱。

7.? 觀察結(jié)果時(shí)應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝集以及緡錢狀形成的區(qū)別。