C端測序
蛋白質(zhì)是由氨基酸脫水縮合形成的鏈狀高分子化合物,包含氨基端(—NH2,N端)和羧基端(—COOH,C端)兩個(gè)末端。C端是蛋白質(zhì)重要的結(jié)構(gòu)和功能部位,一些特殊的翻譯后修飾如C端剪切等,通過影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)而影響其生物學(xué)功能。因此,對(duì)蛋白C末端的氨基酸種類和序列進(jìn)行研究有助于揭示蛋白的結(jié)構(gòu)和功能。?
當(dāng)前C末端測序技術(shù)尚未成熟,常用的C末端測序方法主要有羧肽酶法、化學(xué)法和基于質(zhì)譜的方法等。羧肽酶法和化學(xué)法的策略是通過酶解法或化學(xué)試劑裂解法獲得C端氨基酸,再結(jié)合液相色譜或質(zhì)譜技術(shù)對(duì)氨基酸種類進(jìn)行鑒定。串聯(lián)質(zhì)譜法測定蛋白質(zhì) C端序列的原理是將蛋白質(zhì)樣品酶解、消化成肽段混合物,然后對(duì)肽段混合物進(jìn)行串聯(lián)質(zhì)譜分析,通過一級(jí)質(zhì)譜信息選擇重要的肽段離子進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析,再根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)結(jié)合相應(yīng)軟件和數(shù)據(jù)庫分析推導(dǎo)蛋白質(zhì)的完整C端氨基酸序列。?
百泰派克生物科技基于先進(jìn)的ESI和MALDI TOF提供高效精準(zhǔn)的C端測序服務(wù),可以測出封閉和修飾的蛋白質(zhì)C末端,確認(rèn)重組蛋白是否得到完整表達(dá),檢測重組蛋白表達(dá)過程是否發(fā)生斷裂,以及重組蛋白C端序列是否發(fā)生修飾等,歡迎免費(fèi)咨詢。?