Spectronaut17定性深度再度突破,淘汰DDA指日可待?
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Biognosys官方的spectronaut17發(fā)布會(huì)介紹,帶來了Spectronaut17/directDIA+的四大提升:
1)提升鑒定量:相對(duì)于SN16提升10~30(Thermo,Bruker,Sciex最新儀器);
2)改善定量準(zhǔn)確性;
3)使譜圖庫不再必須,相對(duì)于深度分級(jí)建庫定量更準(zhǔn),鑒定深度差距為-10%~+5%;
4)適用于各類實(shí)驗(yàn)和分析手段,包括各類細(xì)胞組織體液,特異性、非特異性酶切體系。
本次Spectronaut17的升級(jí)帶來的最大更新是directDIA+最新升級(jí),direct DIA(direct Data-independent acquisition),即Library-free DIA,與傳統(tǒng)DIA分析策略相比,無需進(jìn)行DDA分級(jí)構(gòu)建圖譜庫,直接利用機(jī)器深度學(xué)習(xí)解析DIA質(zhì)譜原始譜圖,在保留了DIA高通量、高重現(xiàn)、高準(zhǔn)確的特點(diǎn)的同時(shí)提高了效率,縮短了實(shí)驗(yàn)周期,降低了成本。
在此版本中,direct DIA數(shù)據(jù)直接定性的能力(不依賴于譜圖庫,無論實(shí)驗(yàn)還是預(yù)測(cè)庫)達(dá)到史無前例的巔峰,無論進(jìn)行定性還是非標(biāo)記定量分析時(shí),采用DDA方法的必要性已經(jīng)越來越低。
01?常規(guī)組織樣本
數(shù)據(jù)來源:采用鹿明常規(guī)蛋白組學(xué)前處理方法制備多肽,250ng上樣,timsTof Pro2 DIA-PASEF 60分鐘采集,Spectronaut 16和Spectronaut 17 "directDIA+"分別分析。Protein Group及Precursor FDR均1%。
▲圖1大鼠細(xì)胞不同版本Protein Groups鑒定對(duì)比
▲圖2 大鼠細(xì)胞不同版本Precursors鑒定對(duì)比
可以看出directDIA+的Protein Group提升數(shù)量不大,但是在真正用于定量的Precursor數(shù)量實(shí)現(xiàn)了近35%的領(lǐng)先。那么有老師就會(huì)問了,去高豐度蛋白質(zhì)組如何呢?
02?節(jié)約能源體液蛋白定量DeeP
在體液去高豐度蛋白質(zhì)組上,directDIA+有何表現(xiàn)呢?我們做了個(gè)簡單測(cè)試,采用血漿、血清樣本測(cè)試分別對(duì)比。柱形圖3為PG,柱形圖4為Precursors。
▲圖3 血漿、血清不同版本Protein Groups鑒定對(duì)比
▲圖4 血漿、血清不同版本Precursors鑒定對(duì)比
可以看出directDIA+的Protein Group提升數(shù)量大約在20%-30%,并且在真正用于定量的Precursor數(shù)量實(shí)現(xiàn)了近50%的領(lǐng)先。
從以上測(cè)試中可以看到,即使不采用預(yù)測(cè)譜圖庫,directDIA+算法依然能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)簡單樣品的極深度覆蓋。Spectronaut17的巨大優(yōu)勢(shì),想必在未來的DIA定量大隊(duì)列研究中也必將大展拳腳。
鹿明生物通過引進(jìn)最新版的Spectronaut軟件,配合鹿明豐富的樣本處理經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)化色譜質(zhì)譜條件、多重嚴(yán)格質(zhì)控,以及最高端的質(zhì)譜儀器平臺(tái),使我們的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù)數(shù)據(jù)更高深、更準(zhǔn)確、更穩(wěn)定、更全面,期待助力各位科研工作者取得更加豐碩的研究成果。
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