細(xì)胞水平的細(xì)胞增殖是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域非常重要的表型，對細(xì)胞增殖的檢測是檢驗藥物對腫瘤細(xì)胞影響的最主要檢測手段。作為細(xì)胞水平檢測增殖現(xiàn)象的傳統(tǒng)方法，cck8比色法，Edu細(xì)胞增殖檢測在細(xì)胞增殖檢測中被廣泛應(yīng)用。

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一、傳統(tǒng)的腫瘤治療方法

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1.外科手術(shù)治療

2.放射線治療

3.化學(xué)藥物治療

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眾所周知，化療會產(chǎn)生很多不良反應(yīng)，比如：骨髓抑制(血細(xì)胞減少)、胃腸道反應(yīng)、脫發(fā)、發(fā)熱、皮疹、心臟毒性、肝臟毒性、神經(jīng)毒性、泌尿道毒性、局部靜脈炎、致畸、致突變、致癌等等。那么持續(xù)不斷地尋找更好的抗腫瘤藥物勢在必行。

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天然產(chǎn)物在新藥及新藥先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)中起著不可替代的作用，是結(jié)構(gòu)新穎和作用獨特的抗腫瘤化合物的重要來源。美國國立癌癥研究所(NCI)從1955年開始從天然產(chǎn)物中篩選抗腫瘤藥物。目前世界上被批準(zhǔn)廣泛使用的抗腫瘤藥物中,50 %以上來源于天然產(chǎn)物。那么問題來了~

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如何進(jìn)行抗腫瘤藥物的篩選？?以及主要用到哪些實驗方法？

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實際上，抗腫瘤藥物的篩選體系復(fù)雜，涉及到宏觀到微觀水平的一系列實驗。在這里小編，就簡要梳理一下抗腫瘤篩選的關(guān)鍵流程吧：

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二、動物水平的篩選流程：

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三、細(xì)胞水平的篩選

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①抑制腫瘤細(xì)胞增殖實驗

②誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化實驗

③誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡實驗

④抗腫瘤血管生成實驗

⑤腫瘤多藥耐藥性逆轉(zhuǎn)實驗

⑥抗腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移實驗

⑦誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬實驗

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四、抑制腫瘤細(xì)胞增殖實驗

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細(xì)胞水平檢測增殖現(xiàn)象的傳統(tǒng)方法主要有：1）cck8比色法；2）Edu細(xì)胞增殖檢測；

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1）cck8比色法

CCK8是基于WST-8的一種細(xì)胞增殖檢測方法，WST-8是一種水溶性四唑鹽，常用于評估細(xì)胞的代謝活性。在中性pH值及中間電子受體存在的情況下，被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的藍(lán)/紫色甲臜產(chǎn)物（formazan）。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗、細(xì)胞毒性試驗以及藥敏試驗等。

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2）Edu細(xì)胞增殖檢測

如果你需要獲取更直觀和準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)，那么就用Edu細(xì)胞增殖檢測法。EdU細(xì)胞增殖檢測可以直接并準(zhǔn)確地檢測出新DNA的合成。這種檢測不僅能夠測定單個細(xì)胞的增殖，還可以通過任何平臺檢測出細(xì)胞、組織或整個有機(jī)體中的增殖細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖方法簡單，靈敏，方便，快速，準(zhǔn)確，無需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記，以檢測細(xì)胞其他性狀特征，是細(xì)胞增殖檢測的zui佳選擇。

Hela細(xì)胞Edu細(xì)胞增殖檢測結(jié)果，藍(lán)色熒光為DAPI染色的細(xì)胞核，紅色熒光為EdU標(biāo)記的增殖細(xì)胞；（細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光),cat#KTA2031,Abbkine）

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文章來源：細(xì)胞水平的抗腫瘤藥物的篩選——細(xì)胞增殖檢測

http://www.abbkine.cn/antineoplastic-cell-proliferation

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