Biogradetech血漿/血清外泌體提取試劑盒
Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。 ? 本試劑盒基于自主研發(fā)的磁珠,可在不吸附雜質(zhì)的情況下特異性捕獲外泌體,實(shí)現(xiàn)外泌體分離的高純度和高回收率。它具有操作簡單、純度高、回收率高的優(yōu)點(diǎn),特別適合于從血漿和血清中分離外泌體。隔離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流粒度分析、電子顯微鏡檢測、組學(xué)研究、細(xì)胞和動物功能研究等等。 ? 艾美捷血漿/血清外泌體提取試劑盒: 目錄號:A-EXO006 尺寸:50T 儲存:收到后,按照儲存說明儲存套件組件。保質(zhì)期為12月。 ? 血漿/血清外泌體提取試劑盒組成: 套件組件尺寸???????????????規(guī)格(50T)???????????儲存條件 ExoMag Exosome珠子???????500 mg?????????????????4℃ 洗脫緩沖液?????????????????5 mL??????????????????室溫 溶液A????????????????????2x125 mL???????????????4℃
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樣品預(yù)處理: 1.?細(xì)胞去除:將樣品在4℃下以300 g的速度離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。對于無細(xì)胞的樣品,可以跳過這一步驟。 2.?細(xì)胞和細(xì)胞碎片去除:將樣品在4℃下以2000 g的速度離心10分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。 3.?大顆粒物去除:將從步驟2獲得的上清液在4℃下以14000 g的速度離心30分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。 ? 富集外泌體: 1.?取500?μL預(yù)處理后的樣品(如果處理的樣品體積低于500?μL,只需使用溶液A將樣品體積補(bǔ)至500?μL),加入10 mg(±10%變異)的ExoMag外泌體磁珠到一個1.5 mL的離心管中。將離心管固定在平臺搖床上,在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。 2.?將上述離心管放在磁分離架上,靜置5秒鐘,倒掉上清液。 3.?加入1 mL溶液A,通過倒置離心管混合,將其放在磁分離架上靜置5秒鐘,倒掉上清液。 4.?重復(fù)步驟3兩次,保留ExoMag外泌體磁珠。 ? 分離外泌體: 1.?向ExoMag外泌體磁珠中加入100?μL洗脫緩沖液,渦旋30秒鐘。將離心管固定在平臺搖床上,在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。 2.?將離心管放在磁分離架上,靜置5秒鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的1.5 mL離心管中。這個上清液中含有外泌體。 外泌體不應(yīng)長時間存放在洗脫緩沖液中。如果需要長期存儲,請使用超濾管(分子量截留率10 kDa)用PBS溶液替換洗脫緩沖液。 ? 注意事項(xiàng): 1、使用前請將外泌體抽提試劑(41202-A)充分混勻。 2、產(chǎn)品只針對血清/血漿樣本,不適用其它體液或者是細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進(jìn)行細(xì)胞上清外泌體分離,請選用細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。 3、如果想要進(jìn)一步純化外泌體,可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。 4、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 ?