BiogradeTech高活力牛凝血酶>2000IU/mg方案說(shuō)明
凝血酶是由大小分別為31KD和6KD的兩條肽鏈通過(guò)二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶,可從動(dòng)物血漿中利用已激活凝血酶原水解制得,可催化纖維蛋白原(flbrinogen)水解釋放A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進(jìn)一步聚合,在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊,常用于診斷學(xué)中凝血化驗(yàn)、凝血因子檢測(cè)、血液或血漿的脫纖維化等;另外,由于凝血酶切割序列專(zhuān)一,水解效率高,因此在分子生物學(xué)、生物化學(xué)或生物工程制藥研究中也常作為工具酶用于重組融合蛋白(包含凝血酶識(shí)別位點(diǎn))的特異性斷裂。 ? 牛凝血酶(>2000IU/mg)凝血酶(Thrombin)來(lái)源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過(guò)二硫鍵組成的。 ? 艾美捷牛凝血酶(>2000IU/mg): 目錄號(hào):A-CSH002 尺寸:1000U 儲(chǔ)存:2-8°C(36個(gè)月) 分子量:37 kDa 外觀(guān):白色凍干粉或固體塊 比活度:≥2000 |U/mg 純度:SDS-PAGE分析中未觀(guān)察到雜質(zhì)帶 pH(25℃):5.0~6.0 ?
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牛凝血酶(>2000IU/mg)用法: 這種凝血酶是一種廣泛應(yīng)用的蛋白酶,可用于切割標(biāo)簽,并且可以高效地切割質(zhì)量比低至1:2000的蛋白質(zhì)。在20°C至37°C的溫度范圍內(nèi),切割時(shí)間為0.3至16小時(shí)。凝血酶的最佳切割位點(diǎn)是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',其中X4和X3是疏水性氨基酸,X1'和X2'是非酸性氨基酸。一些常用的識(shí)別位點(diǎn)包括L-V-P-R-G-S、L-V-P-R-G-F和M-Y-P-R-G-N。X4-X3-P-R-G-X2'之間的切割比X4-X3-P-K-L-X2'更有效。另一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)是X2-R[K]-X1',其中X2或X1'是甘氨酸,比如A-R-G和G-K-A,切割發(fā)生在第二個(gè)殘基之后。在凝血酶切割位點(diǎn)和N-末端標(biāo)簽之間插入五個(gè)甘氨酸殘基可以改善切割效果。這種"甘氨酸連接肽"可使完全切割所需的酶量減少,并且還可以防止?jié)撛诘腻e(cuò)誤切割。有效的消化緩沖液是含有20 mM Tris-HCl緩沖液和150 mM氯化鈉的pH 8.0的溶液??梢允褂脤?duì)氨基苯甲酰亞胺親和純化、苯甲酰亞胺親和純化或肝素親和純化去除切割產(chǎn)物中的凝血酶。 ? 該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。