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質譜流式應用文章分析——神經免疫:神經發(fā)育過程-百泰派克生物科技BTP

2023-06-09 17:54 作者:百泰派克生物科技  | 我要投稿

質譜流式技術(Mass Cytometry)在藥物開發(fā)和生物制品表征中的潛力巨大。質譜流式細胞術將質譜技術與流式細胞儀相結合,能夠實現(xiàn)對單個細胞的生化成分進行深入研究,幫助我們理解疾病機制,驗證藥物的效果,發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點以及增強生物制藥質量控制。這在生物藥物表征中非常有用,它可以幫助解決以下一些問題:


單細胞層次的分子表征:傳統(tǒng)的質譜技術通常需要大量的樣本以獲取可靠的結果,而質譜流式技術則可以分析單個細胞的生化成分,這可以幫助我們更深入地理解細胞的生物學特性。

生物分子的定量分析:質譜流式技術可以對細胞內的生物分子進行定量分析,包括蛋白質、代謝物和其他生物分子。

細胞異質性的研究:細胞群體中的細胞并非完全相同,它們之間的差異可能影響疾病的發(fā)展和治療的效果。質譜流式技術可以幫助我們研究這種細胞異質性。


百泰派克生物科技BTP采用基于Fluidigm Helios流式細胞儀(Mass Cytometry System for Single Cell Analysis)用于單細胞質譜分析,該平臺能夠完成包括單細胞捕獲、cDNA合成、實時定量PCR分析、目標區(qū)域擴增以及質譜流式細胞分析。


免疫細胞包括多樣化的細胞亞群,它們通過細胞因子介導的互作和直接的細胞-細胞相互作用,與其他免疫和非免疫細胞協(xié)同行使生物學功能。大腦由影響大腦發(fā)育、組織平衡和神經元活動的常駐和浸潤免疫細胞組成。中樞神經系統(tǒng)(CNS)紊亂會引發(fā)廣泛的疾病,包括情緒障礙、腦血管疾病、多動癥和自閉癥等神經發(fā)育疾病,焦慮抑郁、精神錯亂、成癮等精神類疾病,阿爾茨海默(AD)、帕金森(PD)、亨廷頓病(HD)等神經退行性疾病。而這些嚴重危害人類健康,造成沉重的社會負擔。越來越多的證據(jù)表明,免疫系統(tǒng)在中樞神經系統(tǒng)發(fā)育和功能中的作用(圖1)。因此,免疫調節(jié)作為治療中樞神經系統(tǒng)紊亂疾病的一種治療策略,已經得到越來越多的關注。


圖1. 質譜流式細胞術免疫系統(tǒng)在中樞神經系統(tǒng)的作用


質譜流式技術可以對復雜的免疫網(wǎng)絡中的其單個細胞成分進行描述,該技術的出現(xiàn)使得對大腦的高維分析成為可能,從而使人們對神經-免疫相互作用的理解達到新的水平。


人類神經系統(tǒng)發(fā)育的主要程序包括誘導及原始神經胚形成(發(fā)生高峰于妊娠3~4周)、前腦發(fā)育(發(fā)生高峰于妊娠2~3個月)、神經細胞增殖、移行與分化(發(fā)生高峰于妊娠3~5個月)突觸連結及神經回路建立、樹突發(fā)芽、膜興奮性形成的發(fā)生高峰于妊娠5個月至出生后數(shù)年;神經髓鞘化的發(fā)生高峰在出生至出生后8個月左右。利用模式動物闡明神經發(fā)育生物學中存在的基礎性關鍵問題是現(xiàn)代生命科學研究的重要任務。


位于背根神經節(jié) (DRG) 中的軀體感覺神經元將各種感覺刺激傳遞到中樞神經系統(tǒng) (CNS),包括機械壓力、肢體位置變化、溫度、疼痛和瘙癢。有研究開發(fā)了一個41抗體組合,包括關鍵轉錄因子,神經營養(yǎng)因子受體和其他已知在DRG細胞類型的規(guī)范和成熟中起關鍵作用的蛋白質標志物用于研究背根神經節(jié)的發(fā)育。


圖5.質譜流式細胞術用于分析背根神經節(jié)發(fā)育


該研究對C57/BL6小鼠的背根神經節(jié)進行了單細胞質譜流式分析,鑒定并量化了DRG中胚胎和出生后發(fā)育中30種分子不同的體感神經膠質細胞和41種軀體感覺神經元亞型的豐度。對分化軌跡的分析顯示,罕見的細胞共同表達兩個或更多的Trk受體,并過度表達干細胞標志物,這表明這些神經營養(yǎng)因子受體在細胞命運規(guī)范中發(fā)揮了作用(圖5)。

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