焦磷酸鹽?(PPi)?是通過許多生化反應(yīng)產(chǎn)生的，例如?ATP?水解、DNA?和?RNA?聚合、腺苷酸環(huán)化酶形成環(huán)狀?AMP?以及脂肪酸的酶促活化以形成其輔酶?A?酯。艾美捷?PhosphoWroks? 焦磷酸鹽檢測試劑盒為測量焦磷酸鹽提供了最可靠的分光光度法。

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艾美捷熒光法焦磷酸檢測試劑盒使用專有的熒光焦磷酸鹽傳感器，其熒光強度與焦磷酸鹽濃度成正比。與酶偶聯(lián)焦磷酸鹽方法相比，檢測方法更容易、更可靠，后者需要至少兩種酶來檢測焦磷酸鹽。該試劑盒提供了測定焦磷酸鹽的所有基本成分。該試劑盒已成功用于高通量篩選?(HTS)。

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艾美捷熒光法焦磷酸檢測試劑盒熒光酶標(biāo)儀：

勵磁?316?納米

排放?456?納米

隔斷?420?納米

推薦板?純黑色

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艾美捷熒光法焦磷酸檢測試劑盒組件：

組分?A：檢測緩沖液?1?瓶（25?毫升）

組件?B：PPi?傳感器?1小瓶（凍干粉）

組分?C：焦磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品?1?瓶（1?毫升，50?毫米）

組分?D：二甲基亞砜?1?瓶?(200 μL)

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標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：

焦磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品

將?50?μL?的?1 mM?焦磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液加入?450?μL?的?ddH2O?或?50 mM Hepes?緩沖液中，以獲得?100?μM?焦磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液?(PS7)。取?100?μM?焦磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液并在?ddH2O?或?50 mM Hepes?緩沖液中進(jìn)行?1:3?連續(xù)稀釋，以獲得連續(xù)稀釋的焦磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液?(PS6 - PS1)。

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準(zhǔn)備工作解決方案：

將?25?μL?的?200X PPi?傳感器原液加入?5 mL?的檢測緩沖液（組分?A）中，并充分混合以制成?PPi?工作溶液。

注意?????由于該檢測對?PPi?的高靈敏度，使用不含?PPi?的實驗室器具和試劑非常重要。DTT?≥?1 mM?會增加背景，MgCl 2?≥?2 mM?會降低響應(yīng)。

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艾美捷熒光法焦磷酸檢測試劑盒示例：

圖：使用熒光酶標(biāo)儀在純黑色?96?孔板中使用?PhosphoWorks? 熒光焦磷酸鹽檢測試劑盒測量焦磷酸鹽、ATP?和磷酸鹽劑量反應(yīng)。