脂質(zhì)是一類多樣化的分子，包括單甘酯、二甘酯、三甘酯、脂肪、固醇等。脂質(zhì)不僅定義和保持細胞膜完整性，還參與細胞過程，如膜轉(zhuǎn)運、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞凋亡和能量儲存。脂質(zhì)代謝紊亂與多種疾病有關(guān)，如癌癥、糖尿病、阿爾茨海默病和冠心病。 ? 為了研究脂質(zhì)，通常需要首先從組織或培養(yǎng)細胞中提取脂質(zhì)。傳統(tǒng)上，優(yōu)先選擇的是Folch方法進行有機提取，但該方法存在一些缺點。首先，它將脂質(zhì)提取到底部的有機相中，在純化過程中需要穿透上層含有蛋白質(zhì)的相，導(dǎo)致脂質(zhì)樣本受到污染。因此，低純度的脂質(zhì)樣本可能會阻塞高壓液相色譜儀（HPLC）等儀器，從而妨礙下游的脂質(zhì)分析。此外，F(xiàn)olch方法使用氯仿作為有機相溶劑。長期吸入氯仿會對肝臟產(chǎn)生影響，如肝炎和黃疸。此外，已經(jīng)證明氯仿對動物具有致癌作用，導(dǎo)致腎臟和肝臟腫瘤的增加。實際上，美國環(huán)境保護局（EPA）將氯仿分類為B2組，即可能對人類具有致癌作用。 ? Cell Biolabs的脂質(zhì)提取試劑盒（#STA-612）通過有機提取分離總脂質(zhì)，但通過將脂質(zhì)提取到上層無氯仿的有機相（適用于高通量提?。?，規(guī)避了上述缺點。將粗脂質(zhì)樣本（如血清或組織培養(yǎng)細胞沉淀）懸浮于一種專有醇中。在添加專有有機化合物后，混合物通過離心進行相的重力分離。然后將回收的上層有機相干燥并重新懸浮以進行下游脂質(zhì)分析。每個試劑盒提供足夠的試劑，可根據(jù)100 μL樣本量進行最多50次提取?？梢允褂酶蟮臉颖玖?，每個試劑盒提供的提取次數(shù)會相應(yīng)減少。 ? 艾美捷脂質(zhì)提取試劑盒組成： 脂質(zhì)提取試劑A（零件號261201）：一個25 mL琥珀色玻璃瓶。 脂質(zhì)提取試劑B1（零件號261204）：兩個30毫升琥珀色玻璃瓶。 脂質(zhì)提取試劑B2（零件號261205）：一個20 mL琥珀色玻璃瓶。 脂質(zhì)提取試劑C（零件號261203）：一瓶25 mL ? 脂質(zhì)提取試劑盒相關(guān)研究： 1. STA-613：脂質(zhì)定量試劑盒（比色法） 2. STA-369：OxiSelect?人類氧化低密度脂蛋白（MDA-LDL）ELISA試劑盒（MDA-LDL定量） 3. STA-384：總膽固醇測定試劑盒（比色法） 4. STA-391：HDL和LDL/VLDL膽固醇測定試劑盒 5. STA-394：HDL膽固醇測定試劑盒 6. STA-396：血清甘油三酯定量試劑盒（比色法） 7. STA-398：游離甘油測定試劑盒（比色法） 8. STA-618：游離脂肪酸測定試劑盒（比色法） 9. STA-600：磷脂酰膽堿測定試劑盒 ? 樣品的制備： ?血漿：使用檸檬酸鹽、EDTA、肝素或草酸鹽等抗凝劑采集血液，并通過倒置混勻。將血液在4°C下以1000 x g的速度離心10分鐘。收集上清的血漿，避免干擾白色細胞沉淀層。樣本應(yīng)立即提取或存儲在-80°C。 ?血清：在無抗凝劑的管中采集血液。讓血液在室溫下凝結(jié)30分鐘。以2500 x g的速度離心20分鐘。去除黃色的血清上清，避免干擾白色細胞沉淀層。樣本應(yīng)立即提取或存儲在-80°C。 ?培養(yǎng)細胞：以1000 x g的速度離心5分鐘，沉淀5-10 x 106個細胞。用1X PBS洗滌細胞一次，然后用100 μL 1X PBS重新懸浮最終的細胞沉淀。按照試劑盒方案中的描述進行提取。 ?組織：使用手術(shù)刀/剃刀將組織小心切割成小片，并稱量到50 mL錐形管中。加入足夠的PBS使組織最終濃度達到2 mg/mL。在4°C下均質(zhì)化組織。按照試劑盒方案中的描述，從整個組織勻漿中進行提取。