關(guān)于ctDNA

首先，我們知道循環(huán)游離DNA(circulating cell-free DNA，cfDNA)是一種胞外DNA，存在于血液、腦脊液等體液中，以單鏈或者雙鏈DNA、DNA蛋白質(zhì)復(fù)合物等形式存在。

1948年，人們首次發(fā)現(xiàn)人體血液中存在著游離形式的DNA，甚至要早于沃森和克里克發(fā)現(xiàn)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)。

1999年，香港中文大學(xué)健康科學(xué)研究所所長(zhǎng)盧煜明教授運(yùn)用PCR法擴(kuò)增孕婦外周血漿中的Y染色體特異片段，證明懷有男胎的孕婦血漿中存在胎兒游離DNA。該發(fā)現(xiàn)使在懷孕初期可通過無創(chuàng)方式檢測(cè)胎兒性別、篩查唐氏綜合征等發(fā)育疾病。

每個(gè)人體內(nèi)代謝凋亡的細(xì)胞都會(huì)釋放DNA進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，對(duì)于癌癥患者而言，cfDNA不單來源于上述途徑也來源于腫瘤組織，這種來源于腫瘤細(xì)胞的DNA被稱為循環(huán)腫瘤DNA，簡(jiǎn)稱ctDNA。

ctDNA作用

在腫瘤學(xué)中，腫瘤DNA一般認(rèn)為存在有體細(xì)胞基因突變，以此可以輔助區(qū)分ctDNA和正常cfDNA，這些體細(xì)胞基因突變，僅在癌前細(xì)胞或癌細(xì)胞的基因組中出現(xiàn)，且不會(huì)在同一機(jī)體的其他正常細(xì)胞DNA中出現(xiàn)。

這使得ctDNA可以成為一種良好的腫瘤檢測(cè)標(biāo)志物。因此，當(dāng)腫瘤DNA片段在癌癥患者體內(nèi)大量循環(huán)時(shí)，就可以通過檢測(cè)患者體內(nèi)的ctDNA來反映患者體內(nèi)腫瘤的信息。

與傳統(tǒng)的組織活檢相比，ctDNA檢測(cè)具有微創(chuàng)小、無放射性污染、經(jīng)濟(jì)、新DNA無防腐劑污染等優(yōu)點(diǎn)，并允許對(duì)治療反應(yīng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。

ctDNA的檢測(cè)在臨床的應(yīng)用中，也有諸多有效的研究應(yīng)用；首先，可以在無創(chuàng)的情況下幫助判斷腫瘤患者的生存預(yù)期和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)；

其次ctDNA的檢測(cè)可以輔助指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇臨床治療方案。通過對(duì)ctDNA的基因測(cè)序，能夠確定腫瘤是否對(duì)服用的靶向藥產(chǎn)生抗性突變，醫(yī)生根據(jù)患者的測(cè)序結(jié)果選擇最合適患者的靶向藥物。

在腫瘤的早期篩查中，可以通過高通量測(cè)序技術(shù)來檢測(cè)腫瘤中特有的堿基突變、拷貝數(shù)變異以及基因組結(jié)構(gòu)變異等標(biāo)志物，同時(shí)可以通過表觀遺傳學(xué)的相關(guān)檢測(cè)手段來發(fā)現(xiàn)腫瘤特有的甲基化變異來篩查腫瘤在早期患者體內(nèi)的情況。

在ctDNA檢測(cè)的預(yù)期應(yīng)用中，還可以對(duì)高度惡性的癌癥患者，獲取能改變其起始的治療方案，并獲得巨大療效收益的基因突變信息；對(duì)著檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，ctDNA也能幫助檢測(cè)患者對(duì)治療的反饋，通過在治療前后的不同階段，跟蹤治療療效，識(shí)別腫瘤發(fā)展過程中出現(xiàn)的新的突變和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。

ctDNA保存

血漿中，ctDNA的含量很低，中位值在1%-4%之間，25%的患者接近或低于0.1%，血漿中腫瘤DNA的拷貝數(shù)也較低，中位值在50-100拷貝/mL，其半衰期為16min～2h不等。因此，在ctDNA的檢測(cè)過程中，對(duì)樣本的完整性和檢測(cè)靈敏度都提出了極高的要求。

國(guó)盛醫(yī)學(xué)游離DNA采血管有獨(dú)特的抗凝和保鮮試劑，不干擾游離DNA提取和PCR擴(kuò)增效率；能保證游離DNA在常溫下穩(wěn)定運(yùn)輸存儲(chǔ)7天以上；有效穩(wěn)定有核細(xì)胞，防止釋放細(xì)胞基因組DNA而稀釋目標(biāo)游離DNA，抑制核酸酶降解游離DNA。在ctDNA檢測(cè)步驟中是不可或缺的重要保存產(chǎn)品。