細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)是指通過使用生物反應(yīng)器，在人工條件下，對用于生物制品當(dāng)中的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模高效率的培養(yǎng)技術(shù)。隨著生物技術(shù)的不斷革新、發(fā)展，動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)廣泛地用于病毒的大規(guī)模培養(yǎng)當(dāng)中，這項(xiàng)培養(yǎng)技術(shù)具有非常高效的生產(chǎn)效率，同時(shí)還具有高質(zhì)量與生物安全容易掌控等多方面的優(yōu)點(diǎn)。

在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中用于體外培養(yǎng)的細(xì)胞絕大多數(shù)為動(dòng)物源性，因此這項(xiàng)技術(shù)在獸用疫苗的制備當(dāng)中得到了很好的運(yùn)用。

關(guān)鍵技術(shù) NO.1 -?選擇和懸浮馴化動(dòng)物細(xì)胞系

在動(dòng)物疫苗的生產(chǎn)過程當(dāng)中，安全性、有效性和成本控制是疫苗生產(chǎn)最主要的幾點(diǎn)考慮因素，只有如此才能提高獸用疫苗生產(chǎn)的生產(chǎn)效率，同時(shí)確保生物產(chǎn)品的質(zhì)量具有可靠性。

在生產(chǎn)過程中，做好動(dòng)物細(xì)胞系的選擇和馴化這兩個(gè)方面，對以上幾點(diǎn)要求的優(yōu)化達(dá)標(biāo)具有非常重要的意義。由于同一種細(xì)胞和準(zhǔn)備擴(kuò)增的病毒之間能夠產(chǎn)生相互作用，因此在應(yīng)用某細(xì)胞系進(jìn)行大規(guī)模的疫苗生產(chǎn)之前，應(yīng)該提前與目標(biāo)病毒進(jìn)行相互的適應(yīng)性選擇。同時(shí)，所選細(xì)胞的生長特性對能否進(jìn)行大規(guī)模增殖培養(yǎng)，以及使用哪種工藝進(jìn)行增殖培養(yǎng)具有決定性的作用，這是由于同一種細(xì)胞在不同的培養(yǎng)狀態(tài)下對病毒的敏感程度也不盡相同。另一方面，這項(xiàng)技術(shù)對懸浮細(xì)胞的繁殖效率、活力以及生物穩(wěn)定性等均具有較高的要求，馴化是細(xì)胞懸浮的首要任務(wù)，最好能夠令細(xì)胞的活力維持在 90%以上。

關(guān)鍵技術(shù) NO.2?- 最適培養(yǎng)基的選擇

選擇適宜的培養(yǎng)基是細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)中最為關(guān)鍵性的環(huán)節(jié)。一般情況下，動(dòng)物細(xì)胞的生長必須存在血清這種營養(yǎng)成分，但由于血清的組成成分比較復(fù)雜，并且存在價(jià)格高昂，不同批次間血清組成成分差異較大等弊端，導(dǎo)致這種培養(yǎng)基在實(shí)際的疫苗生產(chǎn)當(dāng)中難于應(yīng)用。

當(dāng)前，隨著技術(shù)的不斷革新，這種血清培養(yǎng)基已經(jīng)被逐漸替代為無血清培養(yǎng)基，有效降低了血清培養(yǎng)基容易被污染的情況，同時(shí)還在一定程度上降低了生產(chǎn)的成本。但由于細(xì)胞培養(yǎng)對培養(yǎng)基具有較高的選擇性，單一一種無血清培養(yǎng)基無法適用于多種細(xì)胞系的培養(yǎng)，這就促使了個(gè)性化無血培養(yǎng)基的快速發(fā)展，可以在無血清培養(yǎng)基當(dāng)中加入適量的轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素或者纖連蛋白等特定的生物活性物質(zhì)，以促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞的快速繁殖生長。

關(guān)鍵技術(shù) NO.3?- 選擇恰當(dāng)?shù)纳锓磻?yīng)器

作為細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)中心的關(guān)鍵性設(shè)備，生物反應(yīng)器主要是利用細(xì)胞或者酶作為生物催化劑，同時(shí)還能夠?yàn)榧?xì)胞的生長繁殖提供一種無菌環(huán)境。

其最大的優(yōu)勢就是能夠進(jìn)行逐級(jí)放大，而由于疫苗生產(chǎn)的成本會(huì)受生產(chǎn)細(xì)胞規(guī)模的影響，因此生物反應(yīng)器的選擇就直接影響到了疫苗生產(chǎn)成本。在疫苗生產(chǎn)中對生物反應(yīng)器的要求通常包括以下幾點(diǎn)：生產(chǎn)效率高、可靠性較強(qiáng)、生產(chǎn)成本較低、安全性能強(qiáng)、活性較強(qiáng)、便于控制質(zhì)量和回收，同時(shí)具有較高的細(xì)胞密度。在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用較多的有以下幾種生物反應(yīng)器，分別是：流床式生物反應(yīng)器、氣升式生物反應(yīng)器和旋轉(zhuǎn)式細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)等。

關(guān)鍵技術(shù) NO.4?- 生產(chǎn)工藝的選擇

生產(chǎn)工藝的選擇決定了細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)最后的投入加工過程，按照培養(yǎng)方式的不同可以分為以下 5 種：分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式以及灌流式操作等幾種操作模式。不同的生產(chǎn)工藝具有其自身的特點(diǎn)與優(yōu)勢，同時(shí)還具有自身相對應(yīng)的生物反應(yīng)器的類型，在實(shí)際生產(chǎn)過程中，可以根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)胞的不同和所生產(chǎn)的疫苗種類，進(jìn)行靈活的優(yōu)化選擇。

來源：《動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)在獸用疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用》劉玉靜，劉召明