艾美捷Detroit R&D GDF-15癌癥酶聯(lián)免疫酶抑制劑試劑盒方案
患者血清中細(xì)胞因子GDF-15(也稱(chēng)為NAG-1或MIC-1)的水平在前列腺癌和骨癌的進(jìn)展1,2。乳腺中的血清GDF-15(NAG-1/MIC-1)水平也增加,結(jié)直腸癌和胰腺癌轉(zhuǎn)移患者。GDF-1(NAG-1/MIC-1)在結(jié)直腸中上調(diào)使用非甾體抗炎藥和包括白藜蘆醇、染料木素、二烯丙基二硫等飲食制劑治療后的癌癥細(xì)胞系和吲哚-3-甲醇2。Detroit R&D實(shí)驗(yàn)室最近的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),GDF-15的聯(lián)合測(cè)量與單純PSA相比,PSA對(duì)診斷前列腺癌癥更有效。GDF-15表達(dá)也是與心血管疾病相關(guān)。
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每個(gè)試劑盒足以對(duì)多達(dá)24個(gè)樣品進(jìn)行一式三份的分析,并包含一個(gè)96孔板GDF-15
標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化檢測(cè)抗體和鏈親和素偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶(HRP),以及
用于稀釋樣品和抗體以及用于板洗滌的緩沖液。
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Cat #GDF-15M:用于小鼠/大鼠GDF-15/NAG-1/MIC-1的兔多克隆抗體
Cat #GDF-15:人GDF-15/NAG-1/MIC-1的山羊多克隆抗體
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艾美捷Detroit R&D?GDF-15癌癥酶聯(lián)免疫酶抑制劑試劑盒化驗(yàn)程序:
步驟1:將100微升樣品稀釋緩沖液裝入空白(BL)孔中。
步驟2:將每種標(biāo)準(zhǔn)品100微升裝入適當(dāng)?shù)木小?/p>
步驟3:將100微升的每個(gè)樣品裝入適當(dāng)?shù)目字小?/p>
步驟4將培養(yǎng)皿在室溫下培養(yǎng)兩個(gè)小時(shí)。
步驟5:每孔用400微升稀釋的洗滌緩沖液洗滌平板三次。
第6步:在三次洗滌循環(huán)的最后一次之后,將盤(pán)子拍干,放在紙巾上。
步驟7:將100微升檢測(cè)抗體添加到除
BL井)。
步驟8:將平板在室溫下培養(yǎng)2小時(shí)
步驟9:每孔用400微升稀釋的洗滌緩沖液洗滌平板三次。
步驟10:將100微升的鏈霉親和素HRP添加到除BL孔外的所有孔中
步驟11:將平板在室溫下培養(yǎng)1小時(shí)
步驟12:每孔用400微升稀釋的洗滌緩沖液洗滌平板三次。
步驟13:將200微升TMB添加到所有井中
步驟14:在室溫下培養(yǎng)30分鐘
步驟15:向所有井中加入50微升2N硫酸
步驟16:在450 nm處讀取板
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計(jì)算結(jié)果:
大多數(shù)讀板器提供數(shù)據(jù)簡(jiǎn)化軟件,可用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并確定樣品濃度。如果您的讀板器沒(méi)有此選項(xiàng),則可以使用數(shù)據(jù)縮減程序(4對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)曲線擬合的參數(shù))。
如果您沒(méi)有這些選項(xiàng),可以按如下方式手動(dòng)獲取結(jié)果:
1.對(duì)空白處的吸光度讀數(shù)進(jìn)行平均,并從板的每個(gè)孔中減去該值,以獲得校正后的讀數(shù)。(注意:有些讀板器會(huì)自動(dòng)執(zhí)行此操作。請(qǐng)參閱您的讀板用戶手冊(cè)讀者。)
2.平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白品的校正吸光度讀數(shù)。
3.通過(guò)繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品(y軸)與標(biāo)準(zhǔn)品的平均凈吸光度來(lái)創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度(x軸;對(duì)數(shù)刻度)
4.使用回歸分析生成的公式來(lái)計(jì)算未知樣本的濃度。
5.將每個(gè)樣品獲得的濃度乘以其相應(yīng)的稀釋系數(shù)。
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Detroit R&D專(zhuān)注于心血管疾病、癌癥的研究,診斷和治療領(lǐng)域。涉及環(huán)境健康科學(xué)、高血壓、乳腺癌和前列腺癌相關(guān)研究領(lǐng)域。艾美捷科技是Detroit R&D的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。