蛋白質(zhì)的SDS-PAGE檢測(cè)
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰氨凝膠電泳是一種常用的蛋白質(zhì)分離純化技術(shù),它利用十二烷基硫酸鈉消除蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和電泳的影響,使蛋白質(zhì)僅根據(jù)分子質(zhì)量差異進(jìn)行分離,廣泛用于蛋白質(zhì)的分離、純度鑒定、分子量鑒定以及表達(dá)分析等。
蛋白質(zhì)SDS-PAGE檢測(cè)包括蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳和電泳后凝膠圖像分析兩個(gè)部分。在蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳過(guò)程中,不同分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)遷移速率不同,相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)在電場(chǎng)的作用下遷移較慢,電泳結(jié)束后仍然靠近點(diǎn)樣孔;而低分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)遷移速率較快,電泳結(jié)束后處于離點(diǎn)樣孔較遠(yuǎn)的位置。經(jīng)銀染或考馬斯亮藍(lán)等方法染色后,便可以觀察到凝膠上蛋白質(zhì)條帶的大小、數(shù)量和分布情況。
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