本期與您分享的是：IGF2BP2通過m6A增強LincRNA01116的穩(wěn)定性：m6A是子癇前期患者的潛在生物標(biāo)志物和治療靶點。

子癇前期（PE）是一種以胎盤重構(gòu)失敗為特征的嚴(yán)重并發(fā)癥，是導(dǎo)致胎盤結(jié)構(gòu)和功能改變的主要原因之一。長鏈非編碼RNA的異常表達(dá)與PE的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，linc01116在PE患者中表達(dá)顯著下調(diào)，與子宮螺旋動脈重構(gòu)不良有關(guān)。在體外和體內(nèi)，敲低linc01116顯著降低滋養(yǎng)細(xì)胞的血管生成。在機制上，IGF2BP2通過m6A甲基化調(diào)節(jié)linc01116 RNA的穩(wěn)定性。生物信息學(xué)和其他實驗進(jìn)一步揭示了linc01116通過吸附miR-210-3p在滋養(yǎng)細(xì)胞中上調(diào)AAMP的表達(dá)。

綜上所述，本研究揭示了linc01116在調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細(xì)胞血管生成中的關(guān)鍵作用。此外，本研究為PE的胎盤病理檢測提供了新的線索。

Actinomycin D（Abmole）（https://www.abmole.cn/products/actinomycin-d.html）是一種從土壤細(xì)菌中分離出來的多肽抗生素。

表觀遺傳調(diào)控的最新進(jìn)展揭示了m6A和lncRNA修飾之間的聯(lián)系。m6A修飾的“閱讀器”蛋白在調(diào)節(jié)甲基化mRNA的命運中起著關(guān)鍵作用。多項研究表明PE胎盤組織中m6A甲基化水平異常升高，因此本研究旨在建立m6A的變化與PE中l(wèi)inc01116低表達(dá)之間的關(guān)系。

根據(jù)在線數(shù)據(jù)庫ENCORI（https://starbase.sysu.edu.cn/）中的數(shù)據(jù)，linc01116可以綁定IGF2BP2和YTHDF1（圖3A）。SRAMP數(shù)據(jù)庫（http://www.cuilab.cn/sramp/）中的在線生物信息學(xué)數(shù)據(jù)揭示了linc01116中潛在的m6A甲基化位點。

研究人員對linc01116與m6A“閱讀器”蛋白的結(jié)合情況進(jìn)行了研究，證實了linc01116與IGF2BP2的結(jié)合比YTHDF1更強（圖3B）。IGF2BP2作為m6A的“讀取器”，主要穩(wěn)定RNA23，使用放線菌素D阻斷細(xì)胞RNA轉(zhuǎn)錄，發(fā)現(xiàn)HTR-8/SVneo細(xì)胞中IGF2BP2的敲低顯著縮短了linc01116的半衰期（圖3C）。上述實驗表明，linc01116-結(jié)合蛋白IGF2BP2維持了mRNA的穩(wěn)定性。

此外，MeRIP-qPCR分析顯示，抗m6A抗體在linc01116的200-300bp片段中高度富集（圖3D），而抗m6A抗體在linc01116的200-300bp片段中高度富集（圖3E）。這些發(fā)現(xiàn)表明IGF2BP2通過m6A依賴的方式增強linc01116 RNA的穩(wěn)定性。

此外，5個配對胎盤樣本中IGF2BP2的免疫組化染色（圖3F）和western blot分析結(jié)果（圖3G）顯示，PE中IGF2BP2的表達(dá)水平下調(diào)，與RT-qPCR分析結(jié)果一致（圖3H）。

隨后，我們評估了IGF2BP2對滋養(yǎng)細(xì)胞的影響，包括網(wǎng)絡(luò)形成能力、遷移和侵襲能力。與其他三種細(xì)胞系相比，HTR-8/SVneo中IGF2BP2 mRNA的表達(dá)明顯高（圖3I）。因此，我們選擇si-IGF2BP2-1#和si-IGF2BP2-3#進(jìn)行后續(xù)實驗（圖3J）。用siRNA抑制IGF2BP2表達(dá)可減少HTR-8/SVneo和HUVECs形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)（圖3K）。

總之，這些發(fā)現(xiàn)表明IGF2BP2的沉默抑制了HTR-8/SVneo和HUVECs的侵襲和遷移（圖3L）。因此，IGF2BP2敲低會干擾滋養(yǎng)層細(xì)胞和HUVECs細(xì)胞的侵襲、遷移和網(wǎng)絡(luò)形成。PE胎盤組織IGF2BP2下調(diào)通過m6A修飾增加linc01116的降解，抑制滋養(yǎng)細(xì)胞的血管生成。

m6A修飾是人類mRNA中最常見的修飾。根據(jù)生物信息學(xué)SRAMP數(shù)據(jù)庫（http://www.cuilab.cn/sramp/）的數(shù)據(jù)，AAMP mRNA潛力具有m6A甲基化位點（圖6A）。RIP實驗表明IGF2BP2可以與AAMP mRNA結(jié)合（圖6B）。

此外，與對照組相比，si-IGF2BP2-感染HTR-8/SVneo細(xì)胞中AAMP的mRNA（圖6C）和蛋白（圖6D）水平隨著時間的推移而下降。盡管如此，MeRIP-qPCR分析顯示，m6A僅在AAMP mRNA的1380-1538 bp片段中高度富集（圖6E）。然而，IGF2BP2在預(yù)測位點內(nèi)并未富集（圖6F）。

綜上所述，這些結(jié)果表明IGF2BP2可以提高AAMP mRNA的穩(wěn)定性，但可能不會促進(jìn)m6A修飾。

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Tingting Zhang, et al. J Cell Biochem. 2023 Feb;124(2):239-253.