歷史背景：

瓊斯在1920年的工作通常被認(rèn)為是胰腺核糖核酸酶的“開始”（Richards and Wycoff 1971）。RNase于1938年由Dubos和Thompson分離，并于1940年由Kunitz結(jié)晶。

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1947年，沃辛頓成為第一家生產(chǎn)高度純化的結(jié)晶RNase的公司。在1950年代初期，Armour公司制備了粗結(jié)晶酶，并以非常實(shí)惠的價(jià)格提供。在 1960 年代和 1970 年代，RNase A 是研究的最愛，主要是因?yàn)樗浅岱€(wěn)定，并且以高濃度存在于可訪問的來源牛胰腺中。這些研究導(dǎo)致了晶體結(jié)構(gòu)的闡明（Anfinsen 1959，Groves 1966和Scheraga 1967），氨基酸序列的測(cè)定（Smyth等人，1963），催化機(jī)制的鑒定（Beers 1960），以及折疊途徑的澄清（Hantgan等人，1974）。RNase A是確定正確氨基酸序列的第一種酶和第三種蛋白質(zhì)（Raines 1998）。

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與RNase研究相關(guān)的工作獲得了四項(xiàng)諾貝爾獎(jiǎng)（Anfinsen，Moore，Stein和Merrifield）。大量的文獻(xiàn)和大量的研究使RNase成為20世紀(jì)研究最廣泛的酶（Raines 1998）。

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最近的工作繼續(xù)研究活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中RNase的合成和成熟（Geiger等人，2010）。研究RNA酶的折疊和聚集也仍然有很多工作要做（Benito等人，2008年，Iwaoka等人，2008年，Arai 等人，2010年）。正在研究該酶在癌癥發(fā)展和基因調(diào)控中的作用（Shlyakhovenko 2009），并且正在開發(fā)成癌癥化療劑（Chao等人，2010）。

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艾美捷核糖核酸酶?A（WBC-LS003435）特異性：

RNase A對(duì)嘧啶核苷鍵具有特異性（Volkin和Cohn 1953）。反應(yīng)被認(rèn)為分兩步進(jìn)行。第一步，裂解3'，5'-磷酸二酯鍵，同時(shí)生成2'，3'-環(huán)磷酸二酯中間體。在第二步中，環(huán)磷酸二酯被水解成3'-單磷酸基團(tuán)。第一步是關(guān)于底物的含氮堿的非特異性;然而，第二步對(duì)于末端為2'，3'-環(huán)磷酸鹽的嘧啶核苷酸是絕對(duì)特異性的。RNase B與RNase A對(duì)環(huán)胞苷酸和酵母RNA具有相同的特異性（Plummer和Hirs 1963）。RNase A顯示出對(duì)較大底物的偏好（Nogués等人，1995）。

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該酶在胞苷殘基處的切割速度是尿苷殘基的兩倍（Richards和Wyckoff 1971）。Thr45被發(fā)現(xiàn)對(duì)介導(dǎo)嘧啶特異性最重要，既通過與嘧啶堿形成氫鍵，又在空間位上排除嘌呤堿（del Cardayré和Raines 1994）。Asp83的側(cè)鏈對(duì)于穩(wěn)定含尿苷底物裂解過程中的過渡態(tài)很重要;這種殘留物對(duì)胞苷切割的動(dòng)力學(xué)沒有影響（del Cardayré和Raines 1995）。

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核糖核酸酶?A（WBC-LS003435）技術(shù)說明：

應(yīng)特別注意酶的處理，因?yàn)樗c玻璃表面的親和力。該酶保持活性，但在凍干時(shí)聚集，并在低離子強(qiáng)度的溫度≥2°C的溶液中聚集。RNase A的加熱溶液使DNA酶失活可能不令人滿意，因?yàn)槿绻l(fā)生沉淀形成并且熱處理的DNase可能會(huì)隨著時(shí)間的推移重新激活，RNA酶活性可能會(huì)喪失。代碼： RPDF 適用于需要最低 DNase 和蛋白酶水平且無需進(jìn)一步處理的應(yīng)用。代碼： RAF在某些應(yīng)用中無需處理即可使用。要熱處理 RAF，請(qǐng)使用 10mM 乙酸鹽 pH 5.0 和或不帶 15mM CaCl 2 在 15°C 或更長時(shí)間下在 100°C 下 80 分鐘。 如果在中性pH下加熱，可能會(huì)沉淀。代碼的熱處理：由于磷酸鹽的存在，RASE會(huì)沉淀。 ?

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核糖核酸酶?A部分引用文獻(xiàn)：

Alonso, J. , Nogues, M. and Cuchillo, C.

Modification of Bovine Pancreatic Ribonuclease A with 6-Chloropurine Riboside , Arch Biochem Biophys 246 , 681 , 1986

Alonso, J. , Paolillo, L. , D'Auria, G. , Nogues, M. and Cuchillo, C.

1H-n.m.r. Studies on the Existence of Substrate Binding Sites in Bovine Pancreatic Ribonuclease A , Int J Pept Protein Res 34 , 66 , 1989

Alonso, J. , Paolillo, L. , D'Auria, G. , Nogues, M. and Cuchillo, C.

1-H-n.m.r. Studies on the Specificity of the Interaction Between Bovine Pancreatic Ribonuclease A and Dideoxynucleoside Monophosphates , Int J Pept Protein Res 31 , 537 , 1988