第二十三章? ?分子生物學常用技術與人類基因組計劃

?

自? 測? 題

一、單項選擇題

1.? 關于PCR技術的敘述，下列哪項是錯誤的？（? ? ）。

? ?A.以DNA復制為基礎而建立起來的技術

? ?B.利用PCR技術可完全無誤地擴增基因

? ?C.反應體系需模板、一對引物、4種dNTP、耐熱DNA聚合酶和緩沖溶液

? ?D.以變性-退火-延伸為一周期

2.? 用于鑒定RNA的技術是（? ? ）。

? ?A. Southern印漬分析? ? ? ? ? ? ?B.親和層析

? ?C. Northern印漬分析? ? ? ? ? ? ?D. Western印漬分析

二、多項選擇題

1.? 后基因組時代研究內(nèi)容包括（? ? ）。

? ?A.研究基因產(chǎn)物的功能? ? ? ? ? ?B.基因組序列測定

? ?C.研究不同組織細胞中基因表達的差異

? ?D.人類基因組的物理圖分析

三、名詞解釋

1.? 探針? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 2.? 核轉移技術

四、填空題

1.? 蛋白質(zhì)的印漬分析，也稱為? ? 或? ? 。

五、簡答題

1.? 簡述PCR的工作原理及基本反應步驟。

六、論述題

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參 考 答 案 與 題 解

一、單項選擇題

1.? B? 利用PCR技術擴增基因并非完全無誤，有一定的錯誤率，故PCR擴增的結果需要測序以檢驗正確與否。

2.? C? Northern印漬分析是用來鑒定RNA的。

二、多項選擇題

1.? A C? 基因組序列測定和人類基因組的物理圖分析屬于人類基因組計劃，而不屬于后基因組時代的研究內(nèi)容。

三、名詞解釋

1.? 探針：將已知序列的帶有檢測標記的核酸片段稱為探針。

2.? 核轉移技術：是將動物體細胞胞核全部導入另一個體的去除了胞核的受精卵內(nèi)，使之發(fā)育成個體。這樣的個體所攜帶的遺傳性狀僅來自一個父親或母親個體，因而為無性繁殖。

四、填空題

1.? 免疫印漬技術；Western blotting

五、簡答題

1.? PCR的中文全稱為聚合酶鏈反應。PCR的工作原理是以待擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板5’-末端和3’-末端相互補的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復制的機制，沿著模板鏈延伸合成新的DNA鏈，即可使目的DNA片段得到上百萬倍的擴增。

? ? PCR的基本反應步驟包括：① 變性：將反應系統(tǒng)加熱至95℃，使模板DNA完全變性成為單鏈，同時引物自身和引物之間存在的局部雙鏈也得以消除；② 退火：將溫度下降至適宜溫度，使引物與模板DNA退火結合；③ 延伸：將溫度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP為底物催化DNA的合成反應。上述三步構成一個循環(huán)，新合成的DNA分子繼續(xù)作為下一輪合成的模板，經(jīng)多次循環(huán)（20~30次）后，即可達到擴增DNA片段的目的。

六、論述題