標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)
標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)指在用同位素對(duì)蛋白質(zhì)組進(jìn)行標(biāo)記的情況下對(duì)蛋白組進(jìn)行定量分析。百泰派克生物科技提供基于質(zhì)譜的標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)。
標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)
細(xì)胞內(nèi)各蛋白質(zhì)含量的動(dòng)態(tài)變化對(duì)各種生命過程有著重要影響。例如,在許多疾病的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程中,常常伴隨著某些蛋白質(zhì)的表達(dá)異常。因此,為了研究蛋白組豐度變化對(duì)生命活動(dòng)的影響,定量蛋白質(zhì)組學(xué)應(yīng)運(yùn)而生。目前,定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)主要分為標(biāo)記(Label)和非標(biāo)記的(Label Free)定量策略,其中標(biāo)記策略又分為體內(nèi)標(biāo)記(如 SILAC、15^N 標(biāo)記),以及體外標(biāo)記(如 iTRAQ、TMT標(biāo)記)。顧名思義,標(biāo)記定蛋白質(zhì)組學(xué)就是利用標(biāo)記技術(shù)標(biāo)記蛋白質(zhì)后再進(jìn)行蛋白質(zhì)組的定量。
標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介
SILAC技術(shù):屬于體內(nèi)標(biāo)記,通過在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入輕、中或重型穩(wěn)定同位素標(biāo)記的必需氨基酸賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的標(biāo)記,然后用LC-MS對(duì)樣品進(jìn)行分析即可進(jìn)行相對(duì)定量。

TMT和iTRAQ技術(shù):均屬于體外標(biāo)記,分別由Thermo和Sigma公司開發(fā),定量原理類似,均采用多個(gè)(2-10個(gè))穩(wěn)定同位素標(biāo)簽特異性標(biāo)記多肽的氨基基團(tuán),之后進(jìn)行串聯(lián)質(zhì)譜分析,從而測(cè)得不同樣本中蛋白質(zhì)的相對(duì)含量。