液相色譜法按分離的機(jī)制不同可以分為液固色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法和親和色譜法等。反向色譜（Reversed-phase liquid chromatography，RPLC）屬于一種液液色譜技術(shù)，其流動相和固定相是兩種極性相反的、互不相溶的液體。該法通過將特定的液態(tài)物質(zhì)涂于擔(dān)體表面或化學(xué)鍵合于擔(dān)體表面形成液體固定相，根據(jù)被分離的組分在流動相和固定相中的溶解度不同而分離，在蛋白質(zhì)和多肽等化合物的分離分析以及純度鑒定中廣泛應(yīng)用。

反相色譜法的特點(diǎn)在于固定相的極性比流動相的弱，與之對應(yīng)的正相色譜固定相的極性比流動相的強(qiáng)。RPLC使用非極性物質(zhì)作為固定相，如C18、C8等；流動相為極性的水或緩沖液，為了調(diào)節(jié)樣品物質(zhì)的保留時間、控制樣品在分析過程中的解離等，常常在流動相中加入甲醇、乙腈、丙酮、異丙醇、四氫呋喃等與水互溶的有機(jī)溶劑。