如何配制Tris Hcl緩沖液
Tris hcl緩沖液配置
? ? ? ?緩沖溶液是水基液體，包括弱酸及其共軛堿。由于其化學(xué)性質(zhì)，即使發(fā)生化學(xué)變化，緩沖溶液也可以將pH（酸度）保持在幾乎恒定的水平。緩沖液系統(tǒng)自然存在，但在化學(xué)上也非常有用。
緩沖溶液的用途
? ? ? 在有機(jī)系統(tǒng)中，天然緩沖溶液可將pH值保持在恒定水平，從而可能發(fā)生生化反應(yīng)而不會損害有機(jī)體。當(dāng)生物學(xué)家研究生物學(xué)過程時，他們必須保持相同的pH值。為此，他們使用了準(zhǔn)備好的緩沖溶液。緩沖溶液的產(chǎn)品和概念于1966年首次被描述，今天我們使用的緩沖與許多年前的緩沖液是相同的。
? ? ? 為了有用，生物緩沖液必須滿足多個標(biāo)準(zhǔn)。具體而言，它們應(yīng)該是水溶性的，但不溶于有機(jī)溶劑。它們不應(yīng)能夠通過細(xì)胞膜。另外，在使用它們的所有實(shí)驗(yàn)中，它們必須是無毒，惰性且穩(wěn)定的。
? ? ? ?緩沖溶液天然存在于血漿中，這就是為什么血液在7.35和7.45之間保持一致的pH值的原因。 緩沖液還用于：
發(fā)酵過程
化學(xué)分析
pH計(jì)的校準(zhǔn)
什么是Tris Buffer（Tris 緩沖液）？
? ? ? ?Tris是三（羥甲基）氨基甲烷的縮寫，該化合物由于等滲且無毒，因此常用于鹽水中。 由于Tris的pKa為8.1，pH值在7至9之間，因此Tris緩沖溶液也常用于包括DNA提取在內(nèi)的一系列化學(xué)分析和程序中。 重要的是要知道tris緩沖溶液中的pH確實(shí)會隨著溶液溫度的變化而變化。
如何準(zhǔn)備Tris緩沖液
? ? ? ?Tris常規(guī)緩沖液BIOFOUNT均有銷售，但部分緩沖液自行配制可能更貼近實(shí)驗(yàn)本身。
配制Tris緩沖液需要的材料：
? ? ? 根據(jù)所需溶液的摩爾濃度和所需緩沖液的數(shù)量，計(jì)算所需各項(xiàng)的量。
三羥甲基氨基甲烷；
蒸餾去離子水；
鹽酸。
配制Tris Hcl緩沖液的實(shí)驗(yàn)流程：
首先確定要制備的Tris緩沖液的濃度（摩爾濃度）和體積。例如，用于鹽水的Tris緩沖溶液的范圍從10到100 mM。一旦確定了所要制備的產(chǎn)品，就可以通過將緩沖液的摩爾濃度乘以制備的緩沖液的體積來計(jì)算所需的Tris摩爾數(shù)。 （Tris的摩爾= mol / L x L）
接下來，通過將摩爾數(shù)乘以Tris的分子量（121.14 g / mol）來確定這是多少克Tris。 Tris克=（摩爾）x（121.14 g / mol）
將Tris溶解在蒸餾去離子水中，為所需最終體積的1/3至1/2。
混入HCl（例如1M HCl），直到pH計(jì)為您所需要的Tris-hcl緩沖溶液的pH為止。
用水稀釋緩沖液以達(dá)到所需的最終溶液體積。
Effect of concentration (a) Tris-HCl buffer pH 6.5 at dilution of urea injection concentration 0.001 M with potentiometer voltage 0.316 Volt, (b) Phosphat KH2PO4 buffer pH 7.5 at dilution of urea injection concentration 0.001 M with potentiometer voltage 0.321 Volt.
