細(xì)胞增殖毒性實(shí)驗(yàn)室

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細(xì)胞毒性檢測主要是根據(jù)細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變來進(jìn)行的檢測，常用以下幾種方法：

　　.MTT，XTT法利用線粒體內(nèi)部酶的活性，可以將特定的四唑鹽類進(jìn)行轉(zhuǎn)化，然后通過酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測

　　.LDH（乳酸脫氫酶）的方法通過檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性，來檢測細(xì)胞毒性其它酶方法如檢測上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等

　　·細(xì)胞增殖能力分析試劑盒

　　原理：正常細(xì)胞代謝旺盛，其線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶，可將四唑鹽類物質(zhì)（如MTT，XTT，WST-1等）還原為紫色的結(jié)晶狀的物質(zhì)，沉積在細(xì)胞周圍，然后通過酶標(biāo)儀讀取OD值，從而檢測到細(xì)胞增值狀態(tài)

　　·熒光素發(fā)光法-細(xì)胞生存能力檢測

　　原理：腺苷酸激酶（AK）存在于所有真核和原核細(xì)胞的胞漿中，AK（腺苷酸激酶）具有激活A(yù)DP（二磷酸腺音）生成ATP（三磷酸腺昔）。當(dāng)細(xì)胞受損后，細(xì)胞膜發(fā)生破損，AK會(huì)釋放到培養(yǎng)上清中。該試劑盒利用熒光素酶和熒光素在ATP作用下可以發(fā)光，通過化學(xué)發(fā)光儀可以定量進(jìn)行檢測.LDH法-細(xì)胞毒性檢測

　　原理：LDH乳酸脫氫酶）是一種穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，存在于正常細(xì)胞的胞質(zhì)中，一旦細(xì)胞膜受損，LDH即被釋放到細(xì)胞外；LDH催化乳酸形成丙酮酸鹽，和INT（四唑鹽類）反應(yīng)形成紫色的結(jié)晶物質(zhì)。通過檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的活性，可判斷細(xì)胞受損的程度

　　細(xì)胞毒性是化學(xué)物質(zhì)（藥物）作用于細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)和/或生理過程，如細(xì)胞膜或細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，細(xì)胞的新陳代謝過程，細(xì)胞組分或產(chǎn)物的合成、降解或釋放，離子調(diào)控及細(xì)胞分裂等過程，導(dǎo)致細(xì)胞存活、增殖和/或功能的紊亂，所引發(fā)的不良反應(yīng)。按作用機(jī)制可分3種類型：

　　@基本細(xì)胞毒性，涉及一種或多種上述結(jié)構(gòu)或功能的改變，作用于所有類型的細(xì)胞；

　?、谶x擇細(xì)胞毒性，存在于某些分化細(xì)胞上，主要通過化學(xué)物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化，與特殊受體結(jié)合或特殊的攝入機(jī)制所引發(fā)；

　　③細(xì)胞特殊功能毒性，對細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能損傷輕微，但對整個(gè)機(jī)體損傷非常嚴(yán)重。

　　GB/T 15440-1995環(huán)境中有機(jī)污染物遺傳毒性檢測的樣品前處理規(guī)范GB/T 27831-2011

　　化學(xué)品遺傳毒性釀酒酵母菌基因突變試驗(yàn)方法B/T 27832-2011

　　化學(xué)品遺傳毒性釀酒酵母菌有絲分裂重組試驗(yàn)方法ISO 10993-3-2014

　　醫(yī)療器械的生物評(píng)定第3部分遺傳毒性、致癌力和生殖毒性試驗(yàn)GB/16886.3-2008醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)

　　第3部分：遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗(yàn)SEN ISO 10993-3-2009醫(yī)療器械的生物評(píng)定遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗(yàn)

　　BS EN ISO 10993-3-2014醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)3部分：測試的遺傳毒性，致痘性和生殖毒性DIN EN ISO 10993-3-2009醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)

　　第3部分遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗(yàn)DIN EN ISO 21427-2-2009水的質(zhì)量通過微核誘變測量進(jìn)行遺傳毒性評(píng)估

　　第2部分利用V79細(xì)胞系的混合種群法