Suspension quantitative germicidal test procedure

懸液定量殺菌試驗(yàn)操作程序

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《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版 2.1.1.7.4 懸液定量殺菌試驗(yàn)操作程序—操作程序

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（1）首先按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求配制消毒液。無(wú)特殊說(shuō)明者，一律使用無(wú)菌硬水配制，配制的濃度為待測(cè)濃度的1.25倍（例如要評(píng)價(jià)的消毒液濃度為200mg/L，則應(yīng)配制250mg/L），置20℃±1℃ 水浴備用。

（2）按照2.1.1.2 配制實(shí)驗(yàn)用菌懸液，濃度為1×108cfu/ml～5×108cfu/ml。

（3）取消毒試驗(yàn)用無(wú)菌大試管，先加入0.5ml試驗(yàn)用菌懸液，再加入0.5ml有機(jī)干擾物質(zhì)，混勻，置 20℃±1℃ 水浴中 5min后，用無(wú)菌吸管吸取上述濃度消毒液 4.0 ml 注入其中，迅速混勻并立即記時(shí)。

（4）待試驗(yàn)菌與消毒劑相互作用至各預(yù)定時(shí)間，分別吸取0.5ml試驗(yàn)菌與消毒劑混合液加于 4.5ml 經(jīng)滅菌的中和劑中，混勻。

（5）各管試驗(yàn)菌與消毒劑混合液經(jīng)加中和劑作用 10min 后，分別吸取 1.0ml樣液，按活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)方法測(cè)定存活菌數(shù)，每管樣液接種 2 個(gè)平皿即可。如平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)較多時(shí)，可進(jìn)行系列10倍稀釋后，再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

（6）同時(shí)用稀釋液代替消毒液，進(jìn)行平行試驗(yàn)，作為陽(yáng)性對(duì)照。

（7）所有試驗(yàn)樣本均在 37℃ 溫箱中培養(yǎng)，對(duì)細(xì)菌繁殖體培養(yǎng)48h 觀察最終結(jié)果；對(duì)細(xì)菌芽孢需培養(yǎng) 72h 觀察最終結(jié)果。

（8）試驗(yàn)重復(fù)3次，計(jì)算各組的活菌濃度（cfu/ml），并換算為對(duì)數(shù)值（N），然后按下式計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值:

殺滅對(duì)數(shù)值 (KL)＝對(duì)照組平均活菌濃度的對(duì)數(shù)值（No）－試驗(yàn)組活菌濃度對(duì)數(shù)值（Nx）

計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值時(shí)，取小數(shù)點(diǎn)后兩位值，可以進(jìn)行數(shù)字修約。如果消毒試驗(yàn)組消毒處理后平均生產(chǎn)菌落數(shù)，小于等于1時(shí)，其殺滅對(duì)數(shù)值，即大于等于試驗(yàn)前對(duì)照組平均活菌濃度的對(duì)數(shù)值。

出自：JJ2022

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