GelGreen;熒光核酸染料
2022-12-06 16:57 作者:biofount科研試劑 | 我要投稿
GelGreen 是一種靈敏、穩(wěn)定且對環(huán)境安全的綠色熒光核酸染料,設計用于在瓊脂糖凝膠中染色 dsDNA、ssDNA 或 RNA。 GelGreen 比 SYBR Safe 靈敏得多。 與已知不穩(wěn)定的 SYBR? 染料不同,GelGreen 在水解和熱方面都非常穩(wěn)定。
圖1.GelGreen? 和 SYBR Safe 在 1% 瓊脂糖/TBE 凝膠電泳后染色中的比較。
GelGreen 實驗方法:
膠染法(前染法)
1. 照常制備瓊脂糖凝膠,加入濃縮的10000X GelGreen ,使凝膠中的終濃度為1X(例如制備100ml凝膠,加入染料5μl-10μl,用量可根據(jù)實際情況調(diào)整),輕輕搖晃,倒入膠水。
1Kb以上的Marker,建議減半用量。
2. 按照常規(guī)方法進行電泳,觀察結果。
泡染法(后染法)
1. 按照常規(guī)方法進行電泳。
2. 用 dH2O 將 10000X GelGreen 濃縮液稀釋約 3300 倍至 0.1M NaCl,制成 3X 染色液。 (例如,將 15μl 10000X GelGreen 濃縮液和 5ml 1M NaCl 添加到 45ml dH2O 中)。
3. 小心地將凝膠放入合適的容器中,緩慢加入足量的 3X 染色液以浸沒凝膠。在室溫下?lián)u晃約 30 分鐘。最佳染色時間取決于凝膠厚度和瓊脂糖,濃度略有不同。 3.5-10%丙烯酰胺膠,染色時間一般在30min到1小時之間,再觀察結果。
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