wb蛋白定量
蛋白質(zhì)印跡(Western blotting,WB)是細胞和分子生物學(xué)中的一項重要技術(shù)。通過使用蛋白質(zhì)印跡,研究人員能夠從細胞中提取的復(fù)雜蛋白質(zhì)混合物中鑒定出特定的蛋白質(zhì)。該技術(shù)使用通過三個步驟來完成這一任務(wù):(1)按大小進行蛋白分離,(2)將蛋白轉(zhuǎn)移到固體支持物上,(3)使用合適的一級和二級抗體標(biāo)記靶蛋白進行可視化。
WB通常用于分離和鑒定蛋白質(zhì)的研究,也可用于蛋白含量的鑒定。在這種技術(shù)中,根據(jù)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量差異通過凝膠電泳分離蛋白質(zhì)混合物,然后將分離開來的蛋白條帶轉(zhuǎn)移到PV或NC上,每種蛋白質(zhì)產(chǎn)生一個條帶。將膜與目標(biāo)蛋白特異性的標(biāo)記抗體一起孵育,洗去未結(jié)合的抗體,只留下與目的蛋白結(jié)合的抗體。最后通過顯影薄膜來檢測結(jié)合的抗體。由于抗體只與感興趣的蛋白質(zhì)結(jié)合,因此只能看到一個條帶。條帶的厚度對應(yīng)于存在的蛋白質(zhì)的量;因此,可以預(yù)先做一個條帶厚度與含量關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)即可對蛋白質(zhì)的含量進行鑒定。
百泰派克生物科技基于蛋白印跡WB以及Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供快速準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)定量鑒定服務(wù)技術(shù)包裹,可對各種蛋白進行精確的含量鑒定,包括蛋白質(zhì)提取物、SDS-PAGE蛋白條帶、2D蛋白膠點、pull-down及Co-IP等樣品中的蛋白質(zhì)等,還可根據(jù)需求提供定制化的檢測方案,歡迎免費咨詢。