背景： 生物素標(biāo)記通常用于蛋白質(zhì)或其他靶分子的非放射性標(biāo)記和純化。生物素標(biāo)記利用了生物素（維生素?H）與親和素或鏈霉親和素之間異常強(qiáng)烈的相互作用。生物素對親和素或鏈霉親和素的親和力是蛋白質(zhì)和配體之間已知的最強(qiáng)的非共價(jià)相互作用之一，其解離常數(shù) （Kd） 約為?4x10-14M. BirA?是一種大腸桿菌生物素蛋白連接酶，在需要?ATP?的反應(yīng)中以高效和特異性的方式將生物素共價(jià)添加到?AviTag? 肽中。它的優(yōu)點(diǎn)是產(chǎn)生可用于蛋白質(zhì)捕獲、固定化和功能化的均質(zhì)產(chǎn)品。 ? 大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒（含?BirA?感受態(tài)細(xì)胞）采用方便易用的形式，包含用大腸桿菌菌株?BL21?中的生物素標(biāo)記生物素受體肽所需的所有組分，這是一種化學(xué)感受態(tài)的大腸桿菌?B?菌株。這些細(xì)胞包括一個(gè)含有BirA基因的IPTG誘導(dǎo)質(zhì)粒和一個(gè)鏈霉素或大觀霉素的抗性基因。該試劑盒包含足夠的試劑，包括?BL21?細(xì)胞，用于表達(dá)和標(biāo)記?10 x 1 L?大腸桿菌培養(yǎng)物。 ? 首先使用與AviTag?序列相連的表達(dá)目標(biāo)蛋白的載體（例如：pAN或pAC載體）轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后，IPTG誘導(dǎo)BirA表達(dá)，并將生物素添加到培養(yǎng)物中。BirA?可有效催化生物素與?AviTag? 的特異性結(jié)合。 ? 艾美捷大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒(BirA感受態(tài)細(xì)胞)數(shù)據(jù)案例： 貨號：27461

圖：使用大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒進(jìn)行RAF-1-GST-AviTagM生物素化。 ?

儲存和使用： 儲存/穩(wěn)定性：當(dāng)材料按照指示儲存時(shí)，該檢測試劑盒將在收到之日起長達(dá)?6?個(gè)月內(nèi)發(fā)揮最佳性能。 應(yīng)用：含有AviTag?序列的蛋白質(zhì)/肽的特異性生物素標(biāo)記，用于下游應(yīng)用。 運(yùn)輸溫度：-80°攝氏度 科學(xué)類別：生物素化 僅供研究使用 ? 大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒(BirA感受態(tài)細(xì)胞)文獻(xiàn)參考： Fairhead，?M?和?Howarth，?M.?方法?Mol Biol. 2015;1266: 171–184.