? ? ? ? ? ? ? ?護膚品微生物檢驗員資格證培訓(xùn)報名-化妝品中菌落總數(shù)的檢查方法及步驟！

? ?隨著化妝品使用越來越廣泛。已成為人們?nèi)粘Ｉ钪械谋匦杵?。開展化妝品衛(wèi)生質(zhì)量監(jiān)測。是保障人民健康維護消費者的利益，如使用了細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)的化妝品。會導(dǎo)致皮膚感染 。因此，化妝品細(xì)菌總數(shù)測定是便于判明樣品被污染的程度。是對樣品進行衛(wèi)生學(xué)評價的重要依據(jù) 。

菌落總數(shù)是指化妝品檢樣經(jīng)過處理，并在一定條件下培養(yǎng)后，得到的1g或1ml檢樣中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。

菌落總數(shù)的測定（平板活菌計數(shù)法）是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的菌落（即由一個單細(xì)胞繁殖而成，且肉眼可見的子細(xì)胞群體）的生理及培養(yǎng)特征進行的。也就是說，一個菌落即代表一個單細(xì)胞。

測定時，首先將待測樣品制成均勻的、一系列不同稀釋度的稀釋液，并盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散，使之成為單個細(xì)胞狀態(tài)存在（否則1個菌落就不能代表1個菌）；再取一定稀釋倍數(shù)的一定量稀釋液接種到培養(yǎng)基上，使其均勻分布。菌落由單個細(xì)胞生長繁殖而成，因此通過統(tǒng)計菌落的數(shù)目，可計算樣品中的含菌數(shù)。

由于所計算出的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故不包括死菌，因此菌落總數(shù)的測定又稱為活菌計數(shù)。

菌落總數(shù)可作為判定食品被污染程度的標(biāo)志，也可用于觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動態(tài)，以便在對被檢樣品進行衛(wèi)生學(xué)評價時提供依據(jù)。

前邊所述的細(xì)菌菌落總數(shù)實際上僅為樣品中總細(xì)菌數(shù)的一部分，其余細(xì)菌皆因種種原因未能長出。每種細(xì)菌都有其一定的生理特性，欲將各種細(xì)菌都有培養(yǎng)出來，就必須創(chuàng)造各種不同的培養(yǎng)條件，包括營養(yǎng)、溫度、pH、需氧性等，去滿足各種細(xì)菌的要求。在實際工作中，不可能也不必要培養(yǎng)出所有的細(xì)菌，所得結(jié)果只是能在肉汁營養(yǎng)瓊脂上生長的嗜中溫需氧性的菌落總數(shù)。

二、儀器設(shè)備

（1）培養(yǎng)箱：（36±1）℃。

（2）恒溫水浴鍋：（46±1）℃。

（3）天平。

（4）滅菌廣口瓶或三角瓶：500ml。

（5）滅菌培養(yǎng)皿：皿底直徑9.0㎝。

（6）滅菌吸管：1.0㎝、10.1㎝。

（7）滅菌小試管。

（8）玻璃珠：直徑5㎜。

（9）均質(zhì)機。

（10）滅菌刀、剪刀、鑷子。

（11）酒精燈。

(1) 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

成分：

蛋白胨? ? 10g? ? 瓊脂? ? 15～20g

牛肉膏? ? 3g? ? 蒸餾水? ? 1000mL

氯化鈉? ? 5g? ? pH? 7.2～7.4

制法：將除瓊脂以外的各成分溶于蒸餾水中，用15%的NaOHt調(diào)節(jié)pH使之在7.2～7.4。加入瓊脂，于121℃下高壓滅菌15min

(2) 生理鹽水

成分：

NaCl? ? 0.9g? ? 蒸餾水? ? 100ml

制法：一般每種檢樣配制250ml無菌生理鹽水。稱取2.2gNaCl,加入250ml蒸餾水溶解；分裝于2支大試管中，每支9ml;再量取225ml裝于500ml廣口瓶或三角瓶中，并加入適量的玻璃珠；剩余的裝入另1支試管中，包扎后于121℃下高壓滅菌15min。

(3) 75%的酒精棉球。

四、實驗步驟

1、菌落總數(shù)的檢驗程序（下圖）? ?

? ?在無菌條件下，將25ml(或25g)檢樣剪碎，放入裝有225ml無菌生理鹽水和適量玻璃珠的500ml廣口瓶或三角瓶內(nèi)，經(jīng)充分振搖，形成10-1均勻稀釋液。

用1ml的無菌吸管吸取10-1稀釋液1ml，注入裝有9ml無菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖混合均勻，即為10-2稀釋液。再用此吸管吸取10-1稀釋液各1ml于2個培養(yǎng)皿內(nèi)。

另取1ml的無菌吸管吸取10-2稀釋液1ml，注入裝有 9ml無菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖混合均勻，即為10-3稀釋液。再用此吸管吸取10-2稀釋液各1ml于2個培養(yǎng)皿內(nèi)。

采用相同的方法吸取10-3稀釋液各1ml于2個培養(yǎng)皿內(nèi)。

檢樣在36±1℃下48h后營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中細(xì)菌的菌落數(shù)。

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常年開展如下項目：

? 1.化妝品檢驗員(微生物檢測員、化妝品包裝材料檢驗、化妝品添加劑檢驗)等職業(yè)培訓(xùn);

? 2.食品安全總監(jiān)、食品安全管理師、公共營養(yǎng)師等；

? 3.農(nóng)產(chǎn)品食品檢驗員(農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測員、糧油質(zhì)量檢驗員、食品檢驗員)等職業(yè)資格培訓(xùn);

4.化學(xué)檢驗員(化學(xué)檢驗員、化妝品檢驗員、材料物理性能檢驗員、水質(zhì)檢驗員)等職業(yè)資格培訓(xùn);

? 5.內(nèi)審員(ISO22716化妝品GMPC內(nèi)審員;ISO22000化妝品安全管理體系內(nèi)審員;ISO9001質(zhì)量管理體系內(nèi)審員;ISO14000環(huán)境管理體系內(nèi)審員;OHSAS18000職業(yè)健康安全管理內(nèi)審員;IATF16949汽車行業(yè)質(zhì)量管理內(nèi)審員;ISO17025實驗室質(zhì)量管理體系內(nèi)審員;ISO13485醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系內(nèi)審員)等內(nèi)審員培訓(xùn);

? 6.化妝品檢驗員、微生物檢驗員、醫(yī)療器械檢驗員、衛(wèi)士消毒產(chǎn)品檢驗員；

? 7.計量員、內(nèi)校員、計量管理員、內(nèi)部校驗員、儀校員計量校準(zhǔn)員資格證培訓(xùn)；

? 8、化妝品安全管理員、化妝品安全管理師、化妝品質(zhì)量管理師、公共營養(yǎng)師、營養(yǎng)配餐師、中式烹調(diào)師、健康管理師等化妝品招投標(biāo)加分證書

? 9、化妝品、化妝品行業(yè)出廠檢驗技能培訓(xùn)(理化檢驗及微生物檢驗培訓(xùn))常年開設(shè)。

? ? ?圣問技術(shù)常年在全國各地為醫(yī)療器械、藥包材、化妝品、食品、藥品、保健品企業(yè)、有源醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)，培養(yǎng)具有實操能力的無菌檢驗員、微生物檢驗員、有源醫(yī)療器械檢驗員，為醫(yī)療器械企業(yè)培養(yǎng)管理者代表、ISO13485體系內(nèi)審員、GMP體系內(nèi)審員、ISO9001內(nèi)審員、計量校準(zhǔn)管理內(nèi)校員等質(zhì)量管理人才。