無(wú)菌檢驗(yàn)員資格證微生物化驗(yàn)員培訓(xùn)-微生物接種方法知識(shí)

2023-06-01 17:06 作者:圣問技術(shù)13412086256 0人讀過 | 我要投稿

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一、斜面接種

? （1）在斜面試管上，用記號(hào)筆標(biāo)記接種的菌名、日期和接種者。

? （2）點(diǎn)燃酒精燈。

? （3）將菌種試管和待接種的斜面試管，用大拇指和食指、中指、無(wú)名指握在左手中，并將中指夾在兩試管之間，使斜面向上，成水平狀態(tài)，在火焰邊用右手松動(dòng)試管塞，以利于接種時(shí)拔出。

? （4）右手拿接種環(huán)通過火焰燒灼滅菌，在火焰邊用右手的手掌邊緣和小指，小指和無(wú)名指分別夾持試管塞或試管帽，將其取出，迅速燒灼管口。

? （5）將滅菌的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi)，先將環(huán)接觸試管內(nèi)壁或未長(zhǎng)菌的培養(yǎng)基，達(dá)到冷卻目的，然后再挑取少量菌苔。將接種環(huán)退出菌種試管，迅速伸入待接種的斜面試管，用接種環(huán)在斜面上自底部向上端輕輕地劃直線，勿將培養(yǎng)基劃破，也不要使環(huán)接觸管壁或管口。

? （6）接種環(huán)退出斜面試管，再用火焰燒管口，并在火焰邊將試管塞塞上。將接種環(huán)逐漸接近火焰，再燒灼。如果接種環(huán)上沾的菌體較多時(shí)，應(yīng)先將環(huán)在火焰邊烤干，燒灼，以免未燒死的菌種飛濺出污染環(huán)境，接種病原菌時(shí)更需注意。

無(wú)菌微生物檢驗(yàn)員資格證醫(yī)療器械檢測(cè)員培訓(xùn)

? 液體培養(yǎng)基接種是用接種環(huán)、移液器或吸管等工具，將菌體或菌液移至試管、三角瓶等容器中的液體培養(yǎng)基中的一種接種方法。其操作與斜面接種基本相同，但應(yīng)注意：試管管口或三角瓶瓶口略向上以免培養(yǎng)液流出；加入菌體時(shí)，應(yīng)使接種環(huán)與管內(nèi)壁輕輕研磨，使菌體擦下，塞好棉塞后，將試管在手掌心中輕輕敲打或輕輕搖晃三角瓶，使菌體混合均勻

? ? ? 北京、上海、廣州、深圳、成都、重慶、杭州、西安、武漢、蘇州、鄭州、南京、天津、長(zhǎng)沙、東莞、寧波、佛山、合肥、青島、昆明、沈陽(yáng)、濟(jì)南、無(wú)錫、廈門、福州、溫州、金華、哈爾濱、大連、貴陽(yáng)、南寧、泉州、石家莊、長(zhǎng)春、南昌、惠州、常州、嘉興、徐州、南通、太原、保定、珠海、中山、蘭州、臨沂、濰坊、煙臺(tái)、紹興化妝品廠微生物檢驗(yàn)員（化妝品微檢員），醫(yī)療器械產(chǎn)品無(wú)菌檢驗(yàn)員，衛(wèi)生消毒用品無(wú)菌檢驗(yàn)員，食品微生物檢驗(yàn)員，約品微生物檢驗(yàn)員，水質(zhì)微生物檢驗(yàn)員等一切涉及微生物檢驗(yàn)的相關(guān)人員，考培合格取得微生物檢驗(yàn)員證書；無(wú)菌微生物檢驗(yàn)員資格證報(bào)名基本要求及收費(fèi)：18-60周歲，高中及以上學(xué)歷；初級(jí)（五級(jí)1800元/人）；中級(jí)（四級(jí)2000元/人）；高級(jí)（2200元/人）含資料、鑒定考核、證書等，合格由職業(yè)技能鑒定評(píng)價(jià)中心頒發(fā)微生物檢驗(yàn)員證書，終身有效、聯(lián)網(wǎng)注冊(cè)。

1、試管液體接種

? 試管液體接種是將樣品混懸液加入到盛有指定液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)，或?qū)⒁欢w積、按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定條件下培養(yǎng)過的培養(yǎng)液接入盛有指定液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)（有時(shí)是指接種環(huán)取一環(huán)，或移液管移液器移取一定的體積，例如0.1mL、1mL等）。涉及試管液體接種的操作有MPN法檢測(cè)大腸菌群/大腸桿菌，以及沙門氏菌、單增李斯特氏菌的二次增菌轉(zhuǎn)接操作等。

? 此處以用移液器將一定體積的樣品混懸液接入到盛有指定液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)為例，具體操作如圖。

農(nóng)產(chǎn)品食品檢驗(yàn)員資格證水質(zhì)化驗(yàn)員培訓(xùn)

? ① 用酒精棉消毒操作臺(tái)面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側(cè)，靠近酒精燈放置。將需要進(jìn)行液體轉(zhuǎn)接的試管插在試管架上，置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調(diào)至合適的刻度放于右手附近的架子上。廢物缸放于右手能觸及的范圍內(nèi)。

? ② 點(diǎn)燃酒精燈，左手于酒精燈火焰附近打開移液器吸頭盒，右手持移液器用力插取吸頭兩下以防吸頭松動(dòng)脫落，拔出移液器并蓋上移液器吸頭盒盒蓋。左手取待轉(zhuǎn)接液體試管，試管底部位于左手手心，移液器吸頭和試管口應(yīng)在酒精燈火焰周圍的無(wú)菌區(qū)域之內(nèi)。

? ③ 將試管伸向右手。右手食指，中指，無(wú)名指握住移液器，拇指靠在移液器按鈕上，小指和掌心下緣合圍夾住試管帽并用力拔出。如果操作者的手比較小，可以靠食指無(wú)名指和小指握住移液器，拇指仍靠在液體按鈕上。而中指向外伸，靠中指內(nèi)側(cè)和食指、無(wú)名指外側(cè)夾住試管帽。將試管口和移液器吸頭靠近火焰，試管口灼燒一周，在火焰附近將吸頭剛好伸入試管口，抵住試管內(nèi)壁下側(cè)，同時(shí)按住移液器按鈕至一檔（輕微推不動(dòng)）。不要將移液器吸頭伸到試管底部，而應(yīng)傾斜試管使液面傾斜至試管口附近并沒過吸頭尖端。右手拇指緩慢松開，使液體緩緩吸入洗頭，注意不要吸入空氣。如果有空氣吸入，必須將液體壓回試管重新吸取。當(dāng)右手拇指完全松開時(shí)，撤離移液器，注意吸頭需盡量一直圍繞在在酒精燈火焰附近，并且吸頭務(wù)必保持向下姿勢(shì)以防止液體倒流入移液器內(nèi)部引起污染。

? ④ 吸完液體后，將移液器撤離試管，移液器吸頭移到酒精燈火焰的遠(yuǎn)離操作者的一側(cè)，將試管口在火焰上灼燒滅菌。

? ⑤ 滅菌后，右手小指迅速將試管帽蓋上，此時(shí)移液器吸頭仍然要在火焰形成的無(wú)菌區(qū)域內(nèi)，不可離酒精燈火焰太遠(yuǎn)。蓋上試管帽將試管歸位。

? ⑥ 左手取待轉(zhuǎn)接入液體的試管，右手保持移液器吸頭在酒精燈火焰附近。

? ⑦ 右手保持握移液器姿勢(shì)取下試管帽并灼燒管口。將吸頭抵靠在試管口的內(nèi)壁上，緩緩?fù)苿?dòng)移液器按鈕至底（完全推至第二檔，使殘存在吸頭尖端的液體也流出）。推出液體時(shí)注意不要將吸頭深入試管底部，也不要用力推導(dǎo)致液體飛濺。

? ⑧ 左手將試管口靠近火焰滅菌，移液器吸頭移到酒精燈火焰的另一側(cè)。再次灼燒試管口

? ⑨ 右手保持握移液器姿勢(shì)將試管帽蓋上，將試管歸位。移取液體完畢后，按壓移液器滑動(dòng)桿使吸頭脫落至廢物缸，移液器放回架子。熄滅酒精燈，將臺(tái)面消毒并收拾干凈。

? 相對(duì)于試管的液體接種培養(yǎng)，三角瓶接種培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)在于通氣效果好。多見于霉菌或一些細(xì)菌的復(fù)壯培養(yǎng)或者搖床培養(yǎng)等。操作與前面提到的液體試管接種操作基本相同，最后將液體加入三角瓶的時(shí)候，三角瓶?jī)A斜，移液器吸頭抵在三角瓶的內(nèi)壁，緩緩將液體加入，避免噴濺和氣泡，見下圖。

化妝品檢驗(yàn)員資格證衛(wèi)生消毒產(chǎn)品檢驗(yàn)員培訓(xùn)

? 向肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中接種少量菌體時(shí)，其操作步驟基本與斜面接種時(shí)相同，不同之處是挑取菌體的接種環(huán)放入液體培養(yǎng)基后，應(yīng)在液體表面處的管內(nèi)壁上輕輕磨擦，使菌體從環(huán)上脫落，混進(jìn)液體培養(yǎng)基，塞好試管塞后，搖動(dòng)液體，使菌體在液體中分布均勻，或用試管振蕩器混勻。

? 向液體培養(yǎng)基中接種量大或要求定量接種時(shí)，可將無(wú)菌水或液體培養(yǎng)基注入菌種試管，用接種環(huán)將菌苔刮下，再將菌種懸液以無(wú)菌吸管定量吸出加入，或直接倒入液體培養(yǎng)基。如果菌種為液體培養(yǎng)物，則可用無(wú)菌吸管定量吸出加入或直接倒入液體培養(yǎng)基。整個(gè)接種過程都要求無(wú)菌操作。