對pH可逆的熒光探針用于對細(xì)胞外囊泡及其從活細(xì)胞中的分泌進行原位成像
由于缺乏能夠?qū)崿F(xiàn)原位可視化的技術(shù)，細(xì)胞外囊泡(EVs)是如何從細(xì)胞中分泌的仍有待探究。在此，香港中文大學(xué)蔡宗衡教授設(shè)計了一種對pH可逆的雙吡咯亞甲基硼(BODIPY)熒光探針，并將其用于對活細(xì)胞分泌的EVs進行共聚焦成像而不會引起嚴(yán)重的細(xì)胞毒性。
在基本條件下，該探針主要為非熒光的無色-BODIPY形式，但在被酸化后，它會逐漸切換到具有熒光的母體BODIPY形式。這種pH值引起的轉(zhuǎn)變使其能夠在弱堿性培養(yǎng)基中對酸性EVs(如富含CD81的外泌體和細(xì)胞外多泡體)以及在弱堿性細(xì)胞質(zhì)中對細(xì)胞內(nèi)酸性前體EVs進行成像。與常亮染料相比，其產(chǎn)生的假陽性信號很少。作者將該探針與質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進行聯(lián)合應(yīng)用，揭示了一些EVs通過微管通道從細(xì)胞偽足中被分泌的過程。該探針為研究EVs的細(xì)胞外運輸提供了重要的機制見解，并將進一步推動EVs納米藥物的發(fā)展。
Hanzhuang Liu. et al. A pH-Reversible Fluorescent Probe for in Situ Imaging of Extracellular Vesicles and Their Secretion from Living Cells.?Nano Letters. 2021
DOI: 10.1021/acs.nanolett.1c03110
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.1c03110
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