PTM位點(diǎn)
蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTM)是指蛋白質(zhì)特定氨基酸殘基共價結(jié)合官能基團(tuán)的過程,其通過改變蛋白質(zhì)的物理和化學(xué)性質(zhì)、折疊、構(gòu)象、穩(wěn)定性和活性等從而修飾蛋白質(zhì)的功能,在各種細(xì)胞過程中起著重要作用。蛋白質(zhì)所結(jié)合的官能基團(tuán)的類型以及發(fā)生修飾的氨基酸位點(diǎn)即PTM位點(diǎn)密切影響其生物學(xué)功能,大多數(shù)蛋白質(zhì)類藥物通過某種形式的PTM傳遞其治療效果,分析鑒定蛋白類藥物的PTM位點(diǎn)有助于我們理解其發(fā)揮藥效的生理機(jī)制,也為其體外合成提供了理論依據(jù)。
質(zhì)譜MS或串聯(lián)質(zhì)譜MS/MS技術(shù)靈敏度、精確度以及通量的提高不僅帶來了蛋白質(zhì)組規(guī)模研究的激增,也為蛋白質(zhì)翻譯后修飾位點(diǎn)鑒定提供了良好的技術(shù)手段。經(jīng)過不同修飾的蛋白或多肽,其分子質(zhì)量都會增加相對應(yīng)的官能基團(tuán)的值,如發(fā)生磷酸化修飾,那么連接磷酸基團(tuán)的氨基酸殘基分子質(zhì)量會在原來的基礎(chǔ)上增加97Da,若發(fā)生乙酰化修飾,相對分子質(zhì)量相應(yīng)的增加42Da。利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測修飾后肽段經(jīng)碰撞誘導(dǎo)產(chǎn)生的碎片離子,根據(jù)碎片離子所形成的質(zhì)荷比譜圖,可以計算出其質(zhì)量數(shù)是否發(fā)生偏移,確定是否發(fā)生某種修飾,再將質(zhì)量數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)庫檢索推導(dǎo)肽段序列,確認(rèn)發(fā)生修飾的氨基酸殘基。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC色譜,為廣大科研工作者提供高效快速的翻譯后修飾蛋白質(zhì)組分析服務(wù)技術(shù)包裹,包括磷酸化/糖基化/泛素化/乙?;?甲基化/二硫鍵/亞硝基化等修飾的定性定量分析以及修飾位點(diǎn)分析等,歡迎免費(fèi)咨詢。