培養(yǎng)皿介紹及使用方法和注意事項
培養(yǎng)皿是一種用于盛載液體培養(yǎng)液或固體瓊脂培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的玻璃或塑料圓形器皿。培養(yǎng)皿由一個底和一個蓋組成,是用作培養(yǎng)細(xì)菌的化學(xué)器材,主要材質(zhì)是玻璃或塑料。
培養(yǎng)皿質(zhì)地脆弱、易碎,因此在清洗及拿放時應(yīng)小心謹(jǐn)慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿最好及時清洗干凈,存放在安全、固定的位置,防止損壞、摔壞。

培養(yǎng)皿的分類
根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細(xì)胞培養(yǎng)皿和細(xì)菌培養(yǎng)皿;
根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿,但進(jìn)口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。
根據(jù)大小的不同通常可分為直徑為35mm,60mm,90mm,150mm培養(yǎng)皿;
根據(jù)分隔的不同又可分為2分隔培養(yǎng)皿,3分隔培養(yǎng)皿等;
培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細(xì)胞的貼壁。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實驗室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿和蒸發(fā)皿的區(qū)別
培養(yǎng)皿由一個底和一個蓋組成,一般用來做培養(yǎng)實驗。一般由玻璃或者塑料作成。上蓋有保溫保濕作用。而蒸發(fā)皿是沒有蓋的,是用于蒸發(fā)濃縮溶液或灼燒固體的器皿??诖蟮诇\,有圓底和平底帶柄的兩種。最常用的為瓷制蒸發(fā)皿,也有玻璃、石英、鉑等制成的。質(zhì)料不同,耐腐蝕性能不同,應(yīng)根據(jù)溶液和固體的性質(zhì)適當(dāng)選用。
培養(yǎng)皿的用途
適用于防疫站、醫(yī)院、生物制品、食品工業(yè)、制藥工業(yè)等單位,用于細(xì)菌的分離培養(yǎng)、抗菌素效價檢驗和定性檢驗分析。在農(nóng)業(yè)、水產(chǎn)等科學(xué)研究用于對種子發(fā)牙、植物、昆蟲、魚種的人工培養(yǎng)、孵化研究。電子工業(yè)或其它行業(yè)作為器皿使用。
培養(yǎng)皿使用指南
培養(yǎng)皿通常使用固體培養(yǎng)基制成平板培養(yǎng)(就是平板皿名稱的由來)。平板培養(yǎng)基制作是將已裝好的滅菌瓊脂培養(yǎng)基,用溫水(無菌)溶化,取下試管棉花塞,管口于酒精燈火焰上通過,然后微啟滅菌的培養(yǎng)皿蓋,使試管口能深入為宜,傾入培養(yǎng)基后即可蓋密,再輕輕地?fù)u勻傾入的培養(yǎng)基,使之均勻地分布于皿底上凝結(jié),即得平板培養(yǎng)基。
由于細(xì)菌的繁殖、發(fā)育生長是與所供給的培養(yǎng)基(營養(yǎng))有直接關(guān)系,尤其是作定量檢驗分析,對提供營養(yǎng)物的多少,有決定意義。細(xì)菌培養(yǎng)時對營養(yǎng)提供的多少、是否均勻,培養(yǎng)皿皿底是否平整極為重要。如過培養(yǎng)皿皿底不平,瓊脂的培養(yǎng)基分布將隨培養(yǎng)皿皿底是否平整有厚有薄,薄的部分營養(yǎng)供給就不足,這對定量分析有著密切關(guān)系。但是如果作一般的定性(檢驗細(xì)菌、菌落生長、繁殖等),就可以使用普通培養(yǎng)皿。
細(xì)菌的分離培養(yǎng),一般標(biāo)本中常同時混有數(shù)種細(xì)菌,如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等。凡需研究的細(xì)菌,須先用分離培養(yǎng)法,使其成純種培養(yǎng),通過對細(xì)菌作純種培養(yǎng),用肉汁加2%瓊脂的固體培養(yǎng)基,經(jīng)保溫漏斗以脫脂棉花過濾,注入試管中,二天后檢驗無新菌,再投入培養(yǎng)皿內(nèi),先制成平板,在無菌條件下進(jìn)行接種,接種后把培養(yǎng)皿倒置移入25~35℃的恒溫箱內(nèi)(倒置是避免水蒸氣凝成液滴滴入皿底內(nèi),影響菌落的生長),通過培養(yǎng)進(jìn)一步觀察細(xì)菌的形態(tài)和色澤,研究致病的病菌,以及對化防治的效果。

培養(yǎng)皿使用注意事宜
1、使用前經(jīng)過清潔消毒,培養(yǎng)皿清潔與否對工作影響較大,可影響培養(yǎng)基的酸堿度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會抑制細(xì)菌生長。
2、新購的培養(yǎng)皿應(yīng)先用熱水沖洗,再置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時,使游離堿性物質(zhì)除去,再用蒸餾水沖洗2次。
3、若要培養(yǎng)細(xì)菌,再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣),120℃的溫度下30min滅菌,置室溫中干燥;或用干熱滅菌,就是將培養(yǎng)皿置于烘箱內(nèi),溫度控制在120℃左右的情況下維持2h,即可殺死細(xì)菌的胞牙。
4、經(jīng)過消毒的培養(yǎng)皿才能接種培養(yǎng)使用;
5、平板培養(yǎng)時為何把培養(yǎng)皿倒置:
原因:培養(yǎng)時培養(yǎng)皿中會產(chǎn)生較多的水蒸氣,水蒸氣在皿蓋上凝結(jié)會產(chǎn)生水滴,如果培養(yǎng)皿正置,水滴滴下會將菌落沖散,這樣的話一個大菌落可能會分散開成為很多小菌落,對細(xì)菌的培養(yǎng)和計數(shù)都造成很大的麻煩。如果倒置的話,培養(yǎng)基在上,皿蓋在下,水滴滴下不會滴到菌落上。
培養(yǎng)皿的清潔
1?浸泡:新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應(yīng)立即浸入清水中備刷洗。
2?刷洗:將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復(fù)刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。
3?浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過酸液的強氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應(yīng)少于六小時,一般過夜或更長。放取器皿要小心。
4?沖洗:刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復(fù)注水-倒空15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。

文章來源:“中科聯(lián)盟”公眾號,作者~。
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