16S微生物多樣性測序大發(fā)現(xiàn)!母嬰微塑料暴露對微生物菌群的影響
前言
微塑料(MPs)是指直徑≤5 mm的塑料顆粒。有研究表明人類不斷攝入和吸入的MPs會在腸道中積累,還可以破壞腸道上皮屏障,甚至改變腸道微生物群的豐度和多樣性,可能對健康造成重大風(fēng)險。然而目前對MPs的研究還主要集中在海洋生物上,MPs對哺乳動物甚至人類的毒性影響研究甚少,且沒有研究探討MPs與人類微生物區(qū)系之間的關(guān)系,特別是MPs對孕婦和嬰兒微生物區(qū)系的影響。
2022年10月21日,復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院董瑞華課題組在 Environmental Science & Technology(IF=11.357)上分別發(fā)表了題為“The Association Between Microplastics and Microbiota in Placentas and Meconium: The First Evidence in Humans ”,在母嬰微塑料暴露研究領(lǐng)域取得重要進(jìn)展,研究在胎盤和胎糞樣品中分別鑒定出了不同種類的MPs,其中均以PA和PU為主。同時發(fā)現(xiàn)暴露于幾種MPs與胎盤和胎糞中的微生物群有關(guān)。
基本信息
研究結(jié)果
1、胎盤和胎糞中的微塑料
此前研究計算統(tǒng)計了胎盤和胎糞中直徑在20~500 μm的MPs顆粒的類型及比例(Table. 1、Fig. 2),從顆粒類型來看,所有樣本均檢測到了16種MPs,胎盤中檢測到的MPs中位濃度(P50)為18.0個顆粒/g,胎糞中MPs中位濃度為54.1個顆粒/g,其中 PA 和 PU 均占MPs顆??偭康?8%以上(Fig. 2)。另外,從顆粒直徑來看,20~50 μm的顆粒占比最高,達(dá)到了76.46%以上(Fig. 3)。
Table1 | 比較不同類型微塑料在胎盤和胎糞中的分布(顆粒/g)
Fig2 | 胎盤(A)和胎糞(B)中MPs顆粒類型的分布
Fig3 | 胎盤(A)和胎糞(B)中MPs顆粒直徑的分布
2、胎盤和胎糞中微生物的群落組成
為了探究胎盤和胎糞中的微生物水平的變化,進(jìn)行16S測序分析。胎盤、胎糞從門和屬兩個分類水平上進(jìn)行群落組成分析結(jié)果顯示,在門水平上,胎盤和胎糞主要的3個菌門都是變形菌門、擬桿菌門和厚壁菌門(Fig. 4A、5A)。屬水平上,胎盤的優(yōu)勢菌屬為等;胎糞的優(yōu)勢菌屬為等(Fig. 4B、5B)。
Fig4|? 胎盤微生物在門(A)和屬(B)水平上的物種組成
Fig5 | 胎糞微生物在門(A)和屬(B)水平上的物種組成
3、兩組間腸道微生物群多樣性指數(shù)和腸道微生物群組成的差異? ??
Alpha多樣性結(jié)果顯示,胎糞樣本的Chao1和shannon指數(shù)均高于胎盤組,但不具有統(tǒng)計學(xué)差異(Fig. 6)。作者采用加權(quán)UniFrac和非加權(quán)UniFrac PCoA來評估胎盤和胎糞兩組的樣本生物學(xué)重復(fù)和組間差異(Fig. 7),結(jié)合Anosim(加權(quán)p=0.0001,非加權(quán)p=0.0002)結(jié)果表明,胎盤、胎糞兩組間具有顯著差異性。同時發(fā)現(xiàn)兩組間86個顯著差異菌屬。
Fig6 | 胎盤和胎糞兩組間α-多樣性分析(A:Chao1;B:shannon)
Fig7 | 胎盤與胎糞微生物的非加權(quán)(A)和加權(quán)(B) UniFrac PCOA分析
4、微塑料濃度與α-多樣性指數(shù)的相關(guān)性
為了探究MPs濃度與α多樣性指數(shù)間是否具有相關(guān)性,計算兩者之間的相關(guān)系數(shù),結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有胎糞中檢測到的 PS 與shannon指數(shù)成顯著負(fù)相關(guān)(Table. 2)。?
Table2 | 微塑料濃度與α-多樣性指數(shù)的相關(guān)性研究
5、胎盤微塑料與胎盤微生物菌屬的相關(guān)性
為了探究MPs與微生物菌屬之間的關(guān)系,對二者進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),胎盤中檢測到總的MPs與顯著正相關(guān),其中PA與Prophyromonas顯著正相關(guān),與顯著負(fù)相關(guān)。PE與顯著負(fù)相關(guān)。PET與顯著正相關(guān)。PVC與呈負(fù)相關(guān),與Clade_Ia呈正相關(guān)。PTFE與的正相關(guān)性顯著。EVA與Parabacteroides呈負(fù)相關(guān)。CPE與和之間呈負(fù)相關(guān)(Fig. 8)。
Fig8 | 胎盤微塑料與胎盤微生物屬相關(guān)性的熱圖
6、胎糞中微塑料與胎糞微生物群豐度的相關(guān)性關(guān)系
胎糞中檢測到的總MPs與和 呈正相關(guān);其中PA與和呈正相關(guān);PU與和 呈正相關(guān),總MPs、PA、PU三者均與呈負(fù)相關(guān)。PS與和呈負(fù)相關(guān),與 和呈正相關(guān)。EVA與呈負(fù)相關(guān)(Fig. 9)。
Fig9 | 胎糞微塑料與胎盤微生物屬相關(guān)性的熱圖
研究結(jié)論
本研究在胎盤和胎糞樣本中均檢測到了16種MPs,其中聚酰胺(PA)和聚氨酯(PU)為主要類型,20?50μm顆粒直徑占比達(dá)76.46%。采用16S rRNA微生物多樣性測序對胎盤胎糞中的微生物進(jìn)行檢測分析,發(fā)現(xiàn)二者之間物種組成不同且具有一定組間差異。同時探討MPs暴露與胎盤和胎糞中的微生物菌群間的潛在關(guān)聯(lián),發(fā)現(xiàn)一些菌屬與總MPs和PA、PU均具有強相關(guān)性。綜上所述,研究發(fā)現(xiàn)MPs在胎盤和胎糞樣本中普遍存在,表明孕婦和嬰兒普遍廣泛的MPs暴露,在母-嬰MPs暴露領(lǐng)域取得重要進(jìn)展,為后續(xù)研究提供數(shù)據(jù)支撐和研究思路。
相關(guān)名詞注解:
MP: microplastics,微塑料
PA: polyamide,聚酰胺
PC: polyurethane polycarbonate,聚氨酯聚碳酸酯
PET: polyethylene terephthalate,聚對苯二甲酸乙二醇酯
PP: polypropylene,聚丙烯
PE: polyethylene,聚乙烯
PS: polystyrene,聚苯乙烯
PVC: poly(vinyl chloride),聚(氯乙烯)
PTFE: polytetra?uoroethylene,聚四氟乙烯
EVA: ethylene vinyl acetate copolymer,乙烯醋酸乙烯共聚物
CPE: chlorinated polyethylene,氯化聚乙烯
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(16S rRNA微生物多樣性測序)
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