熒光粉選擇

熒光探針或熒光團(tuán)（熒光染料或蛋白質(zhì)）與二級(jí)抗體或鏈霉親和素偶聯(lián)，以使分析物可視化。每個(gè)熒光團(tuán)都有自己的光譜特性，分子特有的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。Jackson艾美捷熒光有助于多種技術(shù)同時(shí)檢測(cè)多種分析物，包括流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡（表觀熒光、共焦、多光子和超分辨技術(shù)）、Western blotting和ELISA。

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熒光探針的選擇取決于許多實(shí)驗(yàn)變量，如下所述。還有一個(gè)Spectra Viewer Tool可幫助進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

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Jackson艾美捷熒光粉選擇技巧：

熒光團(tuán)的選擇取決于預(yù)期應(yīng)用。樣品的具體情況會(huì)影響選擇，因?yàn)樗鼈兛赡苓m應(yīng)特定熒光團(tuán)的使用，而制備可能會(huì)改變熒光團(tuán)的行為方式。下表列出了一些與為特定技術(shù)選擇熒光團(tuán)相關(guān)的注意事項(xiàng)。

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儀器性能

考慮激發(fā)能力（燈、激光器或LED決定激發(fā)波長(zhǎng)）以及可用通道和濾波器的數(shù)量。還應(yīng)考慮檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)收集持續(xù)時(shí)間和分析后分析。

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需要靈敏度

任何熒光抗體結(jié)合物的檢測(cè)水平取決于染料的亮度和光穩(wěn)定性；抗體活性、特異性和交叉反應(yīng)性；最佳染料抗體比（每摩爾抗體的染料摩爾數(shù)）。已對(duì)每種JIR染料結(jié)合物的這些參數(shù)進(jìn)行了研究，以優(yōu)化抗體檢測(cè)水平并最小化背景。較大的藻膽蛋白具有較高的量子產(chǎn)率（非常明亮），但僅限于表面應(yīng)用。通過(guò)選擇較亮的熒光團(tuán)，可以增強(qiáng)對(duì)表達(dá)差的分析物的檢測(cè)。例如，Alexa Fluor?488比FITC更亮。

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實(shí)驗(yàn)樣品

考慮樣本的自體熒光和重組熒光標(biāo)記蛋白的可能表達(dá)。選擇光譜不與內(nèi)源性熒光重疊的熒光團(tuán)。

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要求分色程度

對(duì)于多種標(biāo)記協(xié)議，染料面板的選擇將受到上述儀器和樣品細(xì)節(jié)的限制。要實(shí)現(xiàn)良好的分色，請(qǐng)選擇光譜重疊最小的熒光團(tuán)。

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Jackson艾美捷光譜查看器

熒光探針或熒光團(tuán)（熒光染料或蛋白質(zhì)）與二級(jí)抗體或鏈霉親和素偶聯(lián)，以使分析物可視化。每個(gè)熒光團(tuán)都有自己的光譜特性，分子特有的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。使用光譜查看器構(gòu)建染料面板，并比較染料的適用性。通常建議用于多重標(biāo)記的四種染料是預(yù)先裝載的，可以根據(jù)需要進(jìn)行更改。

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Jackson ImmunoResearch專注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務(wù)于大學(xué)科研所和醫(yī)院里的動(dòng)物研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)的科學(xué)家。艾美捷科技是Jackson的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。