色譜柱常見問題匯總(七)
一.現(xiàn)在色譜柱和儀器的接口還沒有標準化嗎,除了檢測池的出入管較小外,色譜柱的接口與PEEK頭不匹配的有哪個型號的色譜柱,以后使用的時候需要注意一點。同時發(fā)現(xiàn)使用過金屬接頭的色譜柱再換成PEEK頭,常易漏液,這是因為金屬頭易使色譜柱接口變形嗎?
? ? ? ?答:色譜柱接頭其實大都不是色譜柱廠商自己生產(chǎn)的,供貨商有多個,VICI,Upchurch,Parker等,他們的標準相互之間不統(tǒng)一,那色譜柱接頭的標準就統(tǒng)一不起來。不過一般這個問題也不難解決的,換個接頭就可以了,而且現(xiàn)在有了萬用接頭,可以配所有不同類型的柱頭,不泄露,連接死體積又很小。
二.普通的C18柱能作為正相色譜柱使用嗎?正相色譜體系中最常用也最普通的是那種色譜柱。正相柱在使用過程中與反向柱相比有什么需要注意的地方?
? ? ? ?答:普通C18柱作為正相柱使用,我還沒聽說過。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動相的極性大,反過來,流動相極性大就是反相。C18固定相屬于疏水性相對比較強的,疏水性強就是極性很弱,應該找不出極性比它更弱的流動相了。
? ? ? ?正相體系常見的柱子有:硅膠柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱,最普通的應該就是硅膠柱。正相柱和反相柱比,最需要注意的是水分,正相柱對水分非常敏感,流動相中水分含量的些微變化對保留時間影響很大,因此正相柱測定前平衡時間需要幾個小時甚至更長。
三.色譜柱的柱頭類型與不銹鋼毛細管接頭有6種連接方式(在講義里面提到),那么我們用戶一般是液相色譜儀是固定某一個廠家,而是根據(jù)樣品檢測需要更換不同類型的色譜柱,那么怎么判斷我所購買的色譜柱是否與不銹鋼毛細管是否匹配呢,我之前只是知道安捷倫和waters都有規(guī)定他們自己家的柱子與自己家的儀器配套是最合適的,而其他廠家的色譜柱都很少提及,在不知道的情況下,我們該怎么選擇?月旭的色譜柱柱頭類型屬于哪一種類型呢?
? ? ? ?答:不銹鋼毛細管接頭有個缺點,用過一次后卡匝位置和距離毛細管末端的長度就固定死了。如果下次用的色譜柱的柱頭接口深度和原來的不同,就容易產(chǎn)生死體積和泄漏。產(chǎn)生的死體積一般不大,如果只引起柱效的稍微下降而沒引起拖尾,這個問題就容易被忽略。引起大家關注的是泄漏,如果用了新柱子,發(fā)現(xiàn)和毛細管的接口處有泄漏,就可以判斷是接頭的匹配問題。最好的判斷方法還是:詢問一下廠商色譜柱柱頭的類型和柱頭接口的深度,然后和毛細管接頭的規(guī)格比較。
? ? ? ?如果用PEEK接頭,發(fā)生問題的情況就大大減少,因為PEEK接頭卡匝位置是不固定的。接頭與色譜柱的匹配,并沒有在實際色譜應用中造成很大的問題,有很多人都沒有關注到這個問題。一方面原因是使用PEEK接頭的情況很普遍,另外如果發(fā)現(xiàn)不匹配,換個毛細管接頭還是非常方便的。
四.相對于氣相色譜,液相的優(yōu)勢在哪里?做防腐劑分析時,流動相加入乙酸銨才可以出峰,原理是什么?
? ? ? ?答:液相和氣相相比的優(yōu)勢有很多,我認為主要在于應用范圍更廣。氣相只限于容易氣化的低分子量物質(zhì)的分析測定,對象大部分是基礎化工原材料;而任何能溶解于某溶劑的物質(zhì)都能用液相分析,適用對象是分子量從幾十到幾萬的廣大范圍。在制藥、化工、環(huán)保、食品和刑偵等諸多重要領域,液相都已成為主導的分析分離工具。也有兩者都能應用的交叉情況,但液相的制樣更簡單。液相色譜的出現(xiàn)克服了氣相色譜不能直接用于難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定及高分子化合物的弱點。
五.您提到“磷酸鹽緩沖鹽滲透力強,有加快硅膠溶解的副作用,它的存在會降低pH使用范圍。”,既然這樣,經(jīng)常使用,柱子壽命是否也下降的快呀?
? ? ? ?答:經(jīng)常用磷酸鹽,在其它條件差不多一樣的情況下,柱子壽命肯定比不用磷酸緩沖鹽相對短一些。但用磷酸鹽也有不可取代的優(yōu)點吧,否則不可能現(xiàn)在大部分人還在用。
總結
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