微生物限度檢查中供試液如何制備

? ? ? 微生物限度檢查中供試液的制備:
將供試品制成供試液(一般為1:10),有利于供試品中污染的微生物分散,與培養(yǎng)基充分接觸,提高陽性檢出率。
常用稀釋劑為09無菌氯化鈉溶液,滴眼劑、王漿、蜂蜜制劑可直接用供試品(原液),作為供試液。
在作10倍遞增稀釋時,吸管插入第1級稀釋液內(nèi)不低于25cm,上下反復(fù)吸吹約10次。吸液時,應(yīng)先吸至高于吸管上部刻度少許,然后提起吸管,貼于試管內(nèi)壁調(diào)整液量至刻度,再沿第2級稀釋管的內(nèi)壁在液面上1cm處緩慢吹出全部液體。每個稀釋級需更換吸管。
一般供試品供試液的制備:
1液體制劑:糖漿劑等取樣10ml至含有玻璃珠的錐形瓶內(nèi),加入09無菌氯化鈉溶液90ml1:10的供試液。油劑:取樣10ml''加聚山梨酯-805ml''再加稀釋劑至100ml。不提倡將稀釋劑定量分裝后再滅菌,因高壓滅菌易使液體蒸發(fā)損失。
2固體制劑:
片劑:稱樣10g至研缽量取稀釋劑100ml,先加10ml浸沒樣品,研磨,將上層液倒入錐形瓶,再加少許稀釋劑研磨,同上操作直至樣品全部研細制成1:10的供試液。
丸劑及錠劑:中藥蜜丸取4丸以上剪碎后稱樣10g''放置勻漿儀專用的不銹鋼勻漿杯內(nèi),加入稀釋劑100ml,3000轉(zhuǎn)/分''2min制成1:10的供試液。
膠囊:硬、軟膠囊,稱樣10g,加入稀釋劑100ml''放45℃水浴10分鐘后振搖''使溶解。
腸溶片(膠囊)、稀釋劑用無菌磷酸鹽緩沖液pH68100ml。
茶劑:稱樣10g加稀釋劑100ml浸泡30min,用無菌紗布過濾取濾液(1:10的供試液。
袋泡茶取2袋稱量''加稀釋劑配成1:10浸泡30min。
膠劑:如阿膠,先放4℃冰箱1h''取出后立即稱樣10g,放入勻漿儀內(nèi)搗碎或用無菌的不銹鋼搗罐搗碎,放45℃水浴促溶。
氣霧劑:不含拋射劑的可擰開取樣10ml,加稀釋劑90ml1:10含拋射劑,需先放4℃冰箱1h減壓,然后用無菌鋼錐鉆孔(勿撥出鋼錐),轉(zhuǎn)動鋼錐使拋射劑徐徐拋出,再用無菌注射器抽出全部藥液,然后按標示量用稀釋劑補足為原液,以下操作同液體制劑。
乳膏劑:稱樣10g,加聚山梨酯-805ml促溶''加稀釋劑至100ml。
非水溶性供試品: 司盤單硬脂酸甘油酯法:眼膏、軟膏劑,以凡士林為基質(zhì),不溶于水需加乳化劑使供試品乳化。用減量法稱樣5g,加入含已滅菌溶化并保溫45℃左右的司盤-805g、單硬脂酸甘油酯3g、聚山梨酯-8010g混合物的燒杯中,在45℃水浴中振搖使供試品中凡士林基質(zhì)乳化''慢慢加入45℃左右的09無菌氯化鈉溶液85ml''邊加邊振搖制成1:20供試液。