大腸桿菌致細(xì)菌性前列腺炎動(dòng)物模型【疾病動(dòng)物模型】

【造模機(jī)制】前列腺炎是男性生殖系統(tǒng)的一種非特異性感染疾病,常分為急性和慢性前列腺炎兩大類(lèi),急性前列腺炎均由細(xì)菌引起,而慢性前列腺炎既有細(xì)菌性,又有非細(xì)裙性的。慢性細(xì)菌性前列腺炎是最常見(jiàn)的男性生殖器感染性疾病,發(fā)生率為5%~10%。其中,大腸桿菌的感染占 80%,其次為變形桿菌、克雷伯菌。率絲陽(yáng)性球菌的致病性尚有爭(zhēng)論。細(xì)菌侵人前列腺的途徑主要是由于下尿道炎癥,水腫或梗阻引起尿道壓力增高,導(dǎo)致含菌尿液反流人前列腺導(dǎo)管和腺泡?；蛘呤侵蹦c細(xì)菌經(jīng)淋巴管擴(kuò)散至前列腺或經(jīng)血流到達(dá)前列腺。

【造模方法】家兔、大鼠、小鼠,標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌菌種。常規(guī)手術(shù)器械一套。

1.前列腺注射法將動(dòng)物以乙醚麻醉后,無(wú)菌條件下沿腹正中線剖開(kāi)下腹壁,用鑷子輕輕提起膀胱及兩側(cè)精囊,暴露附于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉(相當(dāng)于人類(lèi)的前列腺外周區(qū),而人類(lèi)的前列腺炎主要發(fā)生于外周區(qū)),于兩側(cè)分別注人的大腸桿菌液各 0.1ml,縫合腹襞肌肉皮膚,消毒紗布包扎,放回籠中。均自由鈦食。該模型所致的急性前列腺炎在 1~3天最為明顯。

2.尿道灌注法單次灌注與反復(fù)灌注:標(biāo)準(zhǔn)致病菌大腸埃希菌,用前置于 37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 18 小時(shí),無(wú)菌生理鹽水配成 1.5×10*CFU/ml菌液。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背位固定,臀部抬高,在無(wú)菌條件下將 10Fr(人用)三腔雙囊尿管插入膀胱,引流尿液后膀胱氣囊注水 5ml,并向外牽拉氣囊堵住膀胱出口,尿道氣囊注水 2m㎡l,然后灌注菌液 2.5ml。兔感染 72 小時(shí)后，即可形成急性細(xì)菌性前列腺炎模型。若反復(fù)灌注,則實(shí)驗(yàn)前 3 天每日1次,以后分別于第10、20、30、40.55 天灌注,末次灌注后 72 小時(shí)處死動(dòng)物,行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和病理學(xué)觀察。觀察指標(biāo)包括前列腺組織有無(wú)充血,水腫、出血、粘連等;前列腺液中白細(xì)胞數(shù)與卵磷脂小體數(shù),前列腺病理學(xué)觀察等。

【模型特點(diǎn)】對(duì)于單次灌注菌液,前 3 天表現(xiàn)為急性炎癥,隨后的7 周,約有 50％的大鼠會(huì)自發(fā)清除前列腺內(nèi)細(xì)菌而不會(huì)發(fā)展為 CBP;而反復(fù)灌注菌液 2 周內(nèi)前列腺呈急性炎癥反應(yīng),8 周后前列腺表現(xiàn)為慢性炎癥病變。急性炎癥表現(xiàn)為前列腺充血水腫,慢性期病理學(xué)觀察表現(xiàn)為腺上皮呈扁平,立方與高柱狀混雜,腺腔分泌物減少,間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)大量的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和成纖維細(xì)胞增生。前列腺液中白細(xì)胞數(shù)與卵磷脂小體數(shù)均超出正常范圍。

【應(yīng)用范圍】本模型是由細(xì)菌感染而發(fā),故可以作為抗菌試驗(yàn)及其藥效學(xué)驗(yàn)證,也可進(jìn)行抗感染試驗(yàn)和止痛試驗(yàn)。很多中醫(yī)藥方如前列舒寧,前列康栓,通列舒膠囊等利用此模型進(jìn)行了抗菌消炎的試驗(yàn)。

【注意事項(xiàng)】注意根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇合適的大腸桿菌的菌量;如果前列腺液難以直接取得,可以測(cè)定前列腺組織內(nèi)白細(xì)胞數(shù)與卵磷脂小體數(shù)來(lái)代替,即在無(wú)菌條件下剖取前列腺并剪碎,取 50mg 加入 200μl 白細(xì)胞稀釋液和 200μl 生理鹽水中,充分混勻,記錄鏡下白細(xì)胞數(shù)及卵磷脂小體密度。

【模型評(píng)價(jià)】?jī)煞N模型均可成功建立細(xì)菌性前列腺炎模型,后者更接近于臨床的發(fā)病模式,可明顯見(jiàn)到前列腺組織充血,水腫,前列腺液呈膿液樣,黏稠,間質(zhì)中可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞等。

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