在做液相色譜過程中，色譜柱的污染在所難免，下圖為污染的硅膠顆粒，色譜柱污染常常會導(dǎo)致色譜柱壓力升高，基線不穩(wěn)，峰形變差等一系列問題，那該如何對色譜柱進行有效的清洗呢？

Q:色譜柱污染來源主要有哪些？
A:1. 分析樣品的殘留帶來的污染；
2. 流動相，系統(tǒng)管路帶來的雜質(zhì)污染；
3. 系統(tǒng)磨損帶來的顆粒性雜質(zhì)；

Q:色譜柱污染有哪些表現(xiàn)形式？如何判斷色譜柱是否污染了？
A:1. 接上色譜柱后，儀器壓力偏高；
2. 基線出現(xiàn)明顯的噪音或者漂移；
3. 峰形出現(xiàn)拖尾、分叉、肩峰等情況；
4. 柱效出現(xiàn)明顯降低等Q:

色譜柱污染了該如何沖洗？

A:

1. 如果是常規(guī)反相色譜柱，可以首先用5%甲醇（乙腈）水沖洗10倍柱體積，可以將緩沖鹽和色譜柱中一些極性化合物沖干凈（如果是緩沖鹽析出造成的色譜柱堵塞，則需沖洗更長時間，且加上柱溫）；然后再用純甲醇或純乙腈沖洗10-20倍柱體積，將一些疏水性的雜質(zhì)沖洗干凈（流速可按正常流速進行沖洗，若色譜柱壓力太高，可適當(dāng)減小流速并延長沖洗時間）；如果上述沖洗之后還是沒有解決問題，可以選擇異丙醇（四氫呋喃）沖洗10-20倍柱體積。

2. 如果是因為生物樣品造成的色譜柱污染，則可在清洗流動相中加入0.1%的TFA，以增強對吸附蛋白質(zhì)的洗脫。

3. 如果是正相色譜柱污染，則可用正己烷，二氯甲烷，異丙醇對色譜柱依次沖洗10倍-20倍柱體積。

4. 另外，建議大家對色譜柱進行反沖，因為色譜柱污染通常都是在柱頭的位置，反沖的效果會更好，也能沖洗掉大多數(shù)堵塞在篩板上的顆粒物。

5. 如果上述步驟都無法解決污染問題，則可考慮拆開柱頭，將篩板取出進行超聲清洗，并更換柱頭污染的填料。這步操作需在廠家的指導(dǎo)下進行，柱頭重新拆裝容易對色譜柱柱效和峰形造成影響。

6. 最后提醒大家的是，在沖洗色譜柱之前，大家最好先把儀器管路沖洗干凈，以免在沖洗的過程中將儀器系統(tǒng)內(nèi)的雜質(zhì)沖到了色譜柱中，增加了新的雜質(zhì)。