3T3-L1是從3T3細胞（Swissalbino）中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細胞到脂肪樣細胞的轉(zhuǎn)變。該細胞鼠痘病毒陰性；可產(chǎn)生甘油三酯，高濃度血清可增強細胞內(nèi)脂肪堆積。

3T3-L1成脂誘導—鋪板注意要點
1. 3T3-L1誘導過程中貼壁能力下降，細胞易脫壁，建議在鋪板前使用0.1%明膠包被，可有效改善細胞貼壁能力。

2. 3T3-L1起始密度不宜過低，一般為90%-100%，過低的鋪板密度會導致脂滴較少。

3. 使用對數(shù)生長期的細胞進行誘導，一般復蘇后建議至少傳代1次再進行鋪板。

3T3-L1成脂誘導—換液注意要點
1. 3T3-L1誘導過程換液需要輕柔，建議沿著培養(yǎng)器皿側(cè)壁輕柔滴加誘導液，防止細胞脫壁；2.細胞預冷容易皺縮，也會增加脫壁的風險，每次換液前培養(yǎng)基應當充分預熱；

3.誘導液配制后應盡快使用，一般不超過3個月。

3T3-L1成脂誘導—染色注意要點
1. 當觀察到脂滴時，便可以進行油紅O染色，如脂滴較小，可以延長誘導時間2-3d。誘導時間過長會導致脂滴脫落到培養(yǎng)基中，隨著換液損失脂滴，所以成脂誘導的染色時間點應以鏡下觀察為準，并不是誘導時間越長越好。2. 油紅O染色液時過飽和溶液，使用1×PBS稀釋后應該沉淀或離心處理，染色時取上層析出物較少的染色液進行染色。

3. 油紅O染色后如需拍照需盡快完成，放置時間過久會導致脂滴脫壁或融合，影響拍照效果。

以上內(nèi)容由海星生物提供 （hycyte.com）

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