1.?百螢 多甲藻黃素-葉綠素-蛋白復(fù)合物參數(shù)

E x (nm) ?????????????????482

E m (nm) ?????????????????678

分??子 量 ?????????????????～35000

溶? ? ??劑? ? ? ? ? ? ? ? ? ?Water

存儲條件 ?????????????????在2-8℃冷藏保存，避免光照

熒光量子產(chǎn)量（QY） ????????1

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2.?百螢 多甲藻黃素-葉綠素-蛋白復(fù)合物介紹及工作原理

PerCP 多甲藻黃素-葉綠素-蛋白復(fù)合物是由藻膽蛋白提取出的一種蛋白復(fù)合物。藻膽蛋白由許多亞基組成，每個亞基具有蛋白質(zhì)骨架，線性四吡咯發(fā)色團(tuán)與其共價結(jié)合。藻紅蛋白（紅色）和藻藍(lán)蛋白（藍(lán)色）是兩種主要的藻膽蛋白。藻紅蛋白（PE）的吸收大值介于490和570nm之間，而藻藍(lán)蛋白（PC）的吸收大值介于610和665nm之間。通常，當(dāng)作為硫酸銨沉淀物冷藏儲存時，藻膽蛋白具有良好的長期穩(wěn)定性。純化的膽脂蛋白可以在酸性或堿性條件下解離成亞基，但在室溫下在中性pH下相對穩(wěn)定，濃度大于0.1mg / mL。解離的亞基通常具有比天然色素更低的著色和熒光。建議將所有藻膽蛋白及其結(jié)合物（優(yōu)選在中性緩沖溶液中）冷藏，從不冷凍。

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藻膽蛋白[包括B-藻紅蛋白（B-PE），R-藻紅蛋白（R-PE）和別藻藍(lán)蛋白（APC）]是用于生物學(xué)檢測的超靈敏熒光染料。 它們比傳統(tǒng)的有機(jī)熒光團(tuán)靈敏度高100倍。 即使在諸如流式細(xì)胞術(shù)和免疫測定的實(shí)際應(yīng)用中，藻膽蛋白綴合的抗體的靈敏度通常遠(yuǎn)大于相應(yīng)的基于有機(jī)分子的綴合物的靈敏度。 Phycobiliproteins是亮的熒光標(biāo)簽，具有多個位點(diǎn)，可與許多生物和合成材料形成穩(wěn)定的結(jié)合。

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藻紅蛋白（B-PE）具有三個吸收帶，在545nm處具有大吸收。 B-PE的亞基結(jié)構(gòu)類似于R-PE，但亞基的發(fā)色團(tuán)含量不同，導(dǎo)致吸收峰的相對強(qiáng)度不同：α和β亞基僅含有PEB，而γ亞基含有PEB和PUB。 B-PE存在于藍(lán)細(xì)菌和紅藻中。 B-PE的強(qiáng)烈粉紅色和橙色熒光幾乎與肉眼無法區(qū)分的R-PE。別藻藍(lán)蛋白在主要的藻膽蛋白中是不穩(wěn)定的，在低濃度下易于解離，包括進(jìn)行某些測定的濃度。 出于這個原因，許多研究人員更喜歡使用在α和β亞基之間化學(xué)交聯(lián)的CL-APC，并且比APC更穩(wěn)定。

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藻紅蛋白（R-PE）從紅藻中分離。其主要吸收峰位于565nm，第二峰位于496nm和545nm。 次生峰的相對突出性在來自不同物種的R-PE之間顯著不同。R-PE具有三種類型的亞基：α（~20,000道爾頓），β（~20,000道爾頓）和γ（~30,000道爾頓）。已發(fā)現(xiàn)????????完整R-PE的分子量為約240,000道爾頓，并且已確定（αβ）6γ的亞基結(jié)構(gòu)。R-PE的α亞基僅含有藻紅蛋白（PEB）發(fā)色團(tuán)，而β和γ亞基含有PEB和藻藍(lán)蛋白（PUB）。來自不同物種的R-PE的吸收光譜的可變性反映了亞基的PEB / PUB比率的差異。R-PE和密切相關(guān)的B-PE是強(qiáng)熒光的藻膽蛋白，其量子效率可能超過90％，并且在任何中等濃度的溶液中，其橙色熒光很容易被肉眼看到。

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C-藻藍(lán)蛋白（C-PC）在許多藍(lán)細(xì)菌中作為主要的藻膽蛋白發(fā)生，在一些紅藻中作為次生的藻膽蛋白發(fā)生。該顏料在615和620nm之間具有單個可見吸收大值，在~650nm處具有大熒光發(fā)射。其分子量在70,000至110,000道爾頓之間。顏料由兩個亞基α和β組成，它們以相同的數(shù)量出現(xiàn)，但構(gòu)成分子的α和β對的確切數(shù)目可能因物種而異。α和β亞基都僅含有PCB發(fā)色團(tuán)。 除了直接吸收光之外，這種強(qiáng)烈的藍(lán)色顏料通過熒光能量轉(zhuǎn)移接受來自藻紅蛋白的量子，其中存在PE的生物體。C-PC的紅色熒光轉(zhuǎn)移到別藻藍(lán)蛋白。AAT Bioquest研發(fā)的RPE、APC試劑及試劑盒被國內(nèi)外科研人員靈活運(yùn)用，達(dá)到不俗的科研成果。

3.參考文獻(xiàn)

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Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
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Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
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Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
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Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
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Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
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Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay
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