溫病濕熱證動(dòng)物模型(animal model of hygrothermal syndrome in wen disease)
【造模機(jī)制】溫病濕熱證是中醫(yī)急性熱病中的一類具有特殊性規(guī)律的證候群,為臨床常見的一種病癥,常以脾胃為中心,累及多臟。中醫(yī)認(rèn)為是濕熱病邪侵入人體,與氣候、飲食內(nèi)傷及體質(zhì)有關(guān)。本文介紹的造模方法是根據(jù)中醫(yī)有關(guān)溫病濕熱證的病因病理學(xué)理論及臨床濕熱病的發(fā)病癥狀,主要從“濕、熱和邪毒”三個(gè)方面模擬濕熱病發(fā)病條件,對大鼠施加各種處理因素,建立符合中醫(yī)征候特征的動(dòng)物模型。
【造模方法】
1.實(shí)驗(yàn)材料:Wistar大鼠,雌、雄兼用,體重180一220g,清潔級,超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)試劑盒,大腸桿菌(44851),鼠傷寒沙門氏菌(460894),紅細(xì)胞免疫試劑,自動(dòng)調(diào)溫調(diào)濕造模箱。
2.造模方法 模型1(高脂高糖+造模箱+鼠傷寒沙門氏菌):大鼠飼以高糖高脂飼料,10天后,放入造模箱(溫度35℃,相對濕度95%,下同),96小時(shí)后,灌胃給予鼠傷寒沙門菌2ml/200g,120小時(shí)后,再加強(qiáng)感染1次(1ml/200g),然后將動(dòng)物從造模箱移出,置自然環(huán)境。模型2(高脂高糖+造模箱十大腸桿菌):大鼠飼以高糖高脂飼料,10天后,放入造模箱,72小時(shí)后,尾靜脈注射大腸桿菌1ml/200g,3天后,從造模箱移出。動(dòng)物均為從造模箱移出1小時(shí)內(nèi),尾部采血進(jìn)行檢測,分離紅細(xì)胞,按說明書操作方法提取并測定紅細(xì)胞中SOD和MDA含量。按郭峰方法測定紅細(xì)胞C3b受體(erythrocyte C3b receptor,:E-C3bR)及紅細(xì)胞黏附免疫復(fù)合物(erythrocyte immune complex receptor rosette,E-ICR)。
3.觀察指標(biāo)及方法 紅細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、紅細(xì)胞C3b受體數(shù)、免疫復(fù)合物花環(huán)數(shù)。
【模型特點(diǎn)】 造模大鼠出現(xiàn)紅細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)活性顯著降低,紅細(xì)胞C3b受體數(shù)降低,免疫復(fù)合物花環(huán)數(shù)升高。
【應(yīng)用范圍】 中醫(yī)有關(guān)溫病濕熱證的病因病理學(xué)理論及臨床濕熱病的發(fā)病癥狀的研究,及中醫(yī)病、癥的研究。
【注意事項(xiàng)及模型評估】模型大鼠出現(xiàn)紅細(xì)胞免疫功能顯著降低,紅細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷,符合臨床濕熱病的特征。其造模方法簡單,重復(fù)性好。
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